NCIH2228人非小细胞肺癌细胞

NCIH2228人非小细胞肺癌细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系背景

来源：源自一位 非小细胞肺癌（NSCLC） 患者，组织学类型为 肺腺癌（Adenocarcinoma）。

关键遗传特征：

EML4-ALK融合基因（E13;A20变体）：导致ALK激酶持续激活，对ALK抑制剂（如克唑替尼、阿来替尼）敏感。

TP53突变（部分亚克隆可能携带）。

EGFR/KRAS野生型（区别于EGFR突变型细胞，如HCC827）。

研究意义：主要用于 ALK靶向治疗 和 耐药机制 研究。

2. 培养条件

基础培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素（常规培养）。

特殊需求：

部分研究中会使用 无血清培养基（如用于信号通路研究）。

培养环境：37°C、5% CO，贴壁生长。

传代：

使用 0.25% Trypsin-EDTA 消化，传代比例1:3~1:6，约每周2次。

注意：细胞贴壁较牢，消化时间可稍长（3-5分钟）。

3. 主要研究应用

ALK抑制剂研究：

测试 克唑替尼（Crizotinib）、阿来替尼（Alectinib）、色瑞替尼（Ceritinib） 等药物的敏感性。

研究 ALK抑制剂耐药机制（如ALK二次突变、旁路激活）。

EML4-ALK信号通路：

研究ALK下游通路（如PI3K/AKT、MAPK/ERK、STAT3）。

肿瘤微环境与免疫治疗：

探索PD-1/PD-L1抑制剂在ALK阳性肺癌中的效果（部分研究显示ALK阳性肿瘤对免疫治疗响应较低）。

CRISPR/siRNA基因编辑：

敲除 ALK 或相关基因（如MET、IGF-1R）研究代偿性耐药。

4. 实验注意事项

细胞冻存：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。

支原体检测：定期进行PCR或荧光检测（如MycoAlert）。

耐药模型构建：可通过 逐步增加ALK抑制剂浓度 诱导耐药株。

体内实验：H2228细胞可在 NOD/SCID小鼠 中成瘤，用于 PDX模型 研究。

公司出售的产品：

注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。