NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系

"NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：NCI-H４４１建系于１９８２年（A.F.Gazdar，etal.)。该细胞分离自一名肺腺癌患者的心包液。该细胞能在半固体琼脂糖中形成克隆，并能表达肺泡表面活性蛋白A。该细胞在有血清培养基中倍增时间为５８小时，在无血清培养基中倍增时间为９９-１３８小时。
H-28细胞系相关产品：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品：SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
SK-MEL-5细胞系相关产品：H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３传代,２-３天传一代
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
578T细胞系相关产品：ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞
NKM1细胞系相关产品：ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞
Mia PACA 2细胞系相关产品：U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞
MM96L细胞系相关产品：SF-767细胞、DoHH2细胞、IEC18细胞
MV(4;11)细胞系相关产品：PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
细胞生长特性：贴壁生长
NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：上皮细胞样
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
H1618细胞系相关产品：TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞
L-1210细胞系相关产品：Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
OVTOKO细胞系相关产品：RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
H4-II-E细胞系相关产品：Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
MDAMB436细胞系相关产品：SW-1990细胞、UMR-106细胞、SJRH-30细胞
LS-123细胞系相关产品：Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系
NK92-MI细胞系相关产品：MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
HCC1438细胞系相关产品：SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞
PANC.1细胞系相关产品：HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞
PASMCS细胞系相关产品：138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
MEL-526细胞系相关产品：Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞
HBEpiC细胞系相关产品：RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞
NCI.H226细胞系相关产品：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞
NCI-H2405细胞系相关产品：MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
32D.cl3细胞系相关产品：Mouse Podocyte Clone-5细胞、LS-411N细胞、QBC939细胞
Mia PACA 2细胞系相关产品：U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞
ARH-77细胞系相关产品：RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞
PANC-03-27细胞系相关产品：hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞
BTI-Tn5B14细胞系相关产品：Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
H2023细胞系相关产品：SUPT-1细胞、Hmy.2 CIR细胞、H1651细胞
Caov-3细胞系相关产品：BLO 11细胞、LUDLU 1细胞、SUM-52细胞
SNU354细胞系相关产品：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
H3255细胞系相关产品：RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
U-138MG细胞系相关产品：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞
L-363细胞系相关产品：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
Hs 604.T细胞系相关产品：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞
RAW-264.7细胞系相关产品：HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
T47-D细胞系相关产品：L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞
OCI-AML3细胞系相关产品：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
L615细胞系相关产品：GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
HARAB细胞系相关产品：EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
A9 (Hamprecht)细胞系相关产品：HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞
SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
OCIAML2细胞系相关产品：DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品：BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
HONE-1细胞系相关产品：PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品：AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
WPE-int细胞系相关产品：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞
LP-1细胞系相关产品：KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
PC 61细胞系相关产品：CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
McARH7777细胞系相关产品：NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
Rabbit Kidney 13细胞系相关产品：NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞
Rabbit Kidney 13细胞系相关产品：NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞
SW 403细胞系相关产品：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
OVCAR8细胞系相关产品：RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞
NCI-H441 Cell:人肺腺癌细胞系
SK-N-F1细胞系相关产品：Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
PCI-SG231细胞系相关产品：HT1376细胞、DU-145细胞、DF1细胞
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品：AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
TE-3A细胞系相关产品：COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
HPAF-II/CD18细胞系相关产品：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞
32D/cl3细胞系相关产品：H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞
NEC-8细胞系相关产品：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
NCIH378细胞系相关产品：COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
SW948细胞系相关产品：CL1-5细胞、Ramos 2G6.4C10细胞、Hs895T细胞
SKNBE2细胞系相关产品：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞
DLD1细胞系相关产品：AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
SK-OV-3细胞系相关产品：WM-239-A细胞、H1734细胞、NCI-H747细胞
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