SNU-475 Cell:人肝癌细胞系

"SNU-475 Cell:人肝癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
MCF.10A细胞系相关产品：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
Case 3细胞系相关产品：NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
OCM1A细胞系相关产品：686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SNU-475 Cell:人肝癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MC3T3-E1 Subclone 14细胞系相关产品：P3/X63/Ag8.653细胞、FLS细胞、DMS 53细胞
F442-A细胞系相关产品：MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
hOMF细胞系相关产品：Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
MDA-MB435细胞系相关产品：BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞
细胞生长特性：贴壁生长
SNU-475 Cell:人肝癌细胞系
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞形态特性：上皮样
OVCA 420细胞系相关产品：IOSE 80细胞、RT-112细胞、NK92MI细胞
C-Lu-65细胞系相关产品：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
H-1792细胞系相关产品：Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
SNU-475 Cell:人肝癌细胞系
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞
PG-LH7细胞系相关产品：RSMC细胞、T/GHA-VSMC细胞、CAL 78细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
H740细胞系相关产品：Neuro2a细胞、SUM-190细胞、IOSE80细胞
HEp-2细胞系相关产品：Jurkat-E6细胞、HCC38细胞、beta TC6细胞
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
SKMEL1细胞系相关产品：HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
H82sclc细胞系相关产品：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
H82sclc细胞系相关产品：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞
RPMI 1846细胞系相关产品：AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
RK-13细胞系相关产品：CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
PK136细胞系相关产品：NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
CHP-100细胞系相关产品：PC9细胞、CAL-33细胞、HPDE6c7细胞
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
SW 403细胞系相关产品：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
MUTZ1细胞系相关产品：P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞
Tu-177细胞系相关产品：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
MLA 144细胞系相关产品：ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
22Rv-1细胞系相关产品：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞
OUMS-23细胞系相关产品：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
BT-483细胞系相关产品：C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞
149 PT细胞系相关产品：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞
MCF-7/AdrR细胞系相关产品：RPMI no 8226细胞、NCIH28细胞、HBE135-E6E7细胞
TR-146细胞系相关产品：MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品：211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞
H-1522细胞系相关产品：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
SKNO1细胞系相关产品：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
NCI-H524细胞系相关产品：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
786-0WT细胞系相关产品：PATU-S细胞、BXPC3细胞、TW 01细胞
CaEs17细胞系相关产品：X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞
CCC-ESF-1细胞系相关产品：H1781细胞、Namalwa细胞、MB231细胞
H-1522细胞系相关产品：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
Madison lung细胞系相关产品：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
OCI Ly19细胞系相关产品：H-3255细胞、M-20细胞、HCC70细胞
NK92-MI细胞系相关产品：MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
HBdSMC细胞系相关产品：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
HBdSMC细胞系相关产品：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品：Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
BTT739细胞系相关产品：U-937细胞、H1869细胞、My-La 2059细胞
SNU-475 Cell:人肝癌细胞系
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品：MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
Hs-695-T细胞系相关产品：H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞
VSMC细胞系相关产品：Hce8693细胞、Calu3细胞、IGROV 1细胞
HANK1细胞系相关产品：MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
LP1细胞系相关产品：SW480细胞、HCC 94细胞、AML12细胞
Hs 737.T细胞系相关产品：293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
NRK 49F细胞系相关产品：MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
H-1944细胞系相关产品：SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品：SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞
LNCaP subline C4-2细胞系相关产品：Swiss3T3细胞、HS578T细胞、HCMEC细胞
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