"SNU-475 Cell|人肝癌细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用,如细胞密度GAO于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,ZuiHAO不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞生长:贴壁
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H-2347细胞类似产品::Anglne细胞、A-1847细胞、H-226细胞
HOK细胞类似产品::T98 G细胞、Jurkat细胞、MEG01细胞
Panc327细胞类似产品::KPL-1细胞、HGC-27细胞、32D clone3细胞
NCIH520细胞类似产品::Hepa 1-6细胞、CL1.0细胞、HEC1-B细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SNU-475 Cell|人肝癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,ZuiHAO经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
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细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代比例:对于有限细胞系,传代时以二、四、八或十六倍(传代比率分别是2、4、8和16)降低细胞密度,计算群体倍增数更容易(即分别是传代比率2对应1次倍增,4对应2次倍增,8对应3次倍增,16对应4次倍增);例如,一传八的培养物需要3次倍增才能达到原来相同的细胞密度。脆弱的或生长缓慢的细胞系通常一传二,而有活力的,生长快速的细胞系可以一传八,甚至一传十六。有些连续细胞系可一传五十或一传100。一旦细胞系变为连续细胞系(通常经过150次或200次倍增以上),细胞浓度是主要参数,培养浓度应降至10(4)/ml--10(5)/ml之间。可选择传代间隔合适的传代比率或稀释度,或许为1周或2周,同时要保证:细胞密度不可稀释过低,使其延迟期合理(在24小时以内),可重新进入生长周期;而且在下次传代前不进人平台期。
N-Tera-2细胞类似产品::RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
H-676B细胞类似产品::MHCCLM3细胞、MN-9D细胞、NT2-D1细胞
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Roswell Park Memorial Institute 1846细胞类似产品::PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
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WRL68细胞类似产品::D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
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