NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系

"NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：该细胞１９８２年由A.F.Gazdar建系，源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。
UMC11细胞系相关产品：U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
NCIH661细胞系相关产品：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞
HUT125细胞系相关产品：MLE 12细胞、P3X63Ag8653细胞、32D clone3细胞
HTR-8/SVneo细胞系相关产品：DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
QGY 7701细胞系相关产品：NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞
H1836细胞系相关产品：H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
T47D:A细胞系相关产品：PL-45细胞、FLC7细胞、OACP4 C细胞
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
细胞生长特性：贴壁生长
NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：上皮样
J 774A.1细胞系相关产品：Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞
NCI-H650细胞系相关产品：SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
ECC-1细胞系相关产品：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
CALU1细胞系相关产品：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞
H1651细胞系相关产品：OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞
CEM clone 7细胞系相关产品：NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
LA-N-6细胞系相关产品：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系
SKMEL-31细胞系相关产品：NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
Hs821T细胞系相关产品：ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞
EBNA-293细胞系相关产品：SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞
CAOV3细胞系相关产品：CEL细胞、ACHN细胞、B16-F1细胞
H920细胞系相关产品：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
HCCLM3细胞系相关产品：HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
GM02132细胞系相关产品：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
GM02132细胞系相关产品：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
PANC0327细胞系相关产品：3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品：SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Melan-a细胞系相关产品：HCC15细胞、HNE1细胞、HPAF-2细胞
JIMT细胞系相关产品：HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
T98G细胞系相关产品：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
mIMCD-3细胞系相关产品：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
WPMY1细胞系相关产品：TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞
SCC-1395细胞系相关产品：mREC细胞、HCC-1500细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞
HLE-B3细胞系相关产品：2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
CHG-5细胞系相关产品：SW1573细胞、A375.S2细胞、CL 1-5细胞
B16 F10细胞系相关产品：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
Panc 08.13细胞系相关产品：AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞
Cor L51细胞系相关产品：NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞
3T3-Swiss albino细胞系相关产品：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
NRK-49F细胞系相关产品：SK-MEL 28细胞、SK-N-BE细胞、MCCAR细胞
NCI-SNU-761细胞系相关产品：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
MDCC-MSB1细胞系相关产品：GA10细胞、CHO Lec1细胞、KE-37细胞
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
CMT-167细胞系相关产品：SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
3LL细胞系相关产品：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞
E0771细胞系相关产品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞
PL 45细胞系相关产品：RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞
HOMEC细胞系相关产品：SK-MES细胞、KYSE-510细胞、BEL 7404细胞
SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品：HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞
A3细胞系相关产品：SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品：32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
ketr 3细胞系相关产品：HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞
NCI-H460 Cell:人大细胞肺癌细胞系
SPC-A1细胞系相关产品：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
STC-1细胞系相关产品：Tu-686细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、NIH/3T3细胞
HCT GEO细胞系相关产品：ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞
YH细胞系相关产品：NL-20细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、NCIH596细胞
HuH-6细胞系相关产品：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
HS940细胞系相关产品：Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞
GM04678细胞系相关产品：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞
NCIH716细胞系相关产品：GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞
HEC151细胞系相关产品：Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞
SKNBE-2细胞系相关产品：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
Z-138细胞系相关产品：H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞
NCI-H510A细胞系相关产品：G-292 clone A141B1细胞、Eph4 1424细胞、P3X63-Ag8.653细胞
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