LCLC97TM1人非小细胞肺癌细胞

LCLC97TM1人非小细胞肺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，44岁

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 +20% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3-1:5传代, 2-3天传1代

1. 细胞系基础特征：

来源与分类

组织学类型：人非小细胞肺癌（NSCLC），具体亚型需进一步验证（可能为大细胞癌或腺癌）

建系背景：源自临床样本，可能保留原发肿瘤的异质性和耐药特征

分子特征：

需通过NGS检测驱动基因（如EGFR/KRAS/ALK/ROS1）

免疫特征：PD-L1表达水平待定（建议使用SP142或22C3抗体检测）

研究价值

耐药模型：潜在适用于三代TKI耐药机制研究

转移研究：可能表现高侵袭性（需验证MMP-2/9表达）

2. 核心研究方向：

方向一：靶向治疗开发

基因检测优先：

若存在EGFR T790M突变，可测试奥希替尼联合MET抑制剂的协同效应

RET融合检测（如阳性，测试塞尔帕替尼敏感性）

免疫微环境：

通过流式细胞术分析CD8+/FOXP3+ T细胞比例

方向二：功能机制研究

3D模型构建：

基质胶浓度建议30%（低浓度增强侵袭性表现）

添加HGF（20ng/mL）模拟转移微环境

代谢重编程：

糖酵解抑制剂（2-DG）与线粒体抑制剂（二甲双胍）联用测试

3. 培养与质控：

培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%丙酮酸钠（增强能量代谢）

传代要点：

消化时间：0.25%胰酶+0.02% EDTA处理5分钟

接种密度：3×10? cells/cm2（避免接触抑制）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对ExPASy数据库）

支原体检测（建议用PlasmoTest?试剂盒）

功能验证：

Transwell实验验证侵袭能力（建议8μm孔径）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。