DNA凝胶回收试剂盒

DNA凝胶回收试剂盒

信裕生物的DNA凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit)，是一种用于从DNA琼脂糖凝胶中回收目的DNA的试剂盒。
本试剂盒采用了融胶液，可以使琼脂糖凝胶完全融化。同时采用了一种新型的离子交换柱，在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为15微克。
适用于从DNA琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA的凝胶块中快速提取DNA。该目的DNA通常为PCR产物、质粒DNA酶切出来的DNA片段、超螺旋质粒DNA单酶切后的线性化产物和DNA连接产物等。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。长至30个碱基的引物均可被完全去除。
DNA回收效率通常为60-90%。接近100bp或10kb的DNA片段回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
本试剂盒纯化所得DNA可直接用于酶切，连接，转化细菌，测序，PCR，杂交等后续操作。 
每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。
包装清单：

保存条件：
室温保存，一年有效。
注意事项：
次使用前在溶液II(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明：
1.切胶回收后，称重，将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2.加入等体积的溶液I（如胶为100mg，则加100微升溶液I），vortex或颠倒混匀。
3.50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融，期间，需vortex或颠倒混匀3-4次，以加速凝胶融解。
如果胶碎片较小，3-5分钟即可全融，凝胶碎片较大则需较长时间，胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。50-60℃间任一温度都适合于本试剂盒。如果DNA片段大于5kb，宜颠倒混匀。Vortex容易导致大片段DNA断裂。
4.加入到DNA纯化柱内， 室温放置1分钟。
如果体积较大，DNA纯化柱内容纳不下，可以把部分样品加入到纯化柱内，经离心处理后，再加入剩余的样品继续处理。
5.最高速(16000g，约12000-14000rmp左右)离心1分钟，倒弃收集管内的液体。
注意：这一步一定要达到16000g，较低离心速度会导致回收效率下降。
6.在DNA纯化柱内加入700微升溶液II，室温放置1分钟。
7.最高速离心1分钟，洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
8.再加入500微升溶液II，最高速离心1分钟，进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
9.最高速再离心1分钟，除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
10.将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上，加入30微升溶液III至管内柱面上，放置1分钟。
用1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央，使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶液III沾在管壁上，一定要震动管子，使液体滑落到管底，以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或Milli-Q级纯水替代溶液III，但是水的pH应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA，可以只加20微升溶液III，但产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟，会对提供产量略有帮助。
11.最高速离心1分钟，所得液体即为高纯度DNA。