人G-CSF elisa试剂盒

检测原理：

本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人G-CSF单抗包被于微孔板上，样品和标准品中的G-CSF会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化酶标记的抗人G-CSF多抗，未结合的抗体被洗去；加入底物溶液（显色剂），溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

预包被96孔板、标准品、抗人G-CSF检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：0.089-0.740 pg/mL

检测范围：31.3 - 2,000 pg/mL

回收率范围：96-103%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

粒细胞集落刺激因子（G-CSF）是24-25 kDa单体糖蛋白，可调节嗜中性粒细胞谱系中造血细胞的增殖，分化和激活。 成熟的人G-CSF是一种178个氨基酸（aa）的O-糖基化蛋白，包含两个链内二硫键。 在人类中，交替剪接产生具有3个氨基酸缺失的第二个亚型。 小鼠和人G-CSF具有76％的氨基酸序列同一性，并且这两种蛋白显示出物种交叉反应性。 G-CSF由活化的单核细胞和巨噬细胞，成纤维细胞，内皮细胞，星形胶质细胞，神经元和骨髓基质细胞产生。 另外，各种肿瘤细胞组成性表达G-CSF。

人G-CSF受体（G-CSF R）是一种120 kDa的I型跨膜糖蛋白，属于造血素受体超家族。 成熟蛋白由603氨基酸胞外域（ECD），23氨基酸跨膜片段和186氨基酸胞质域组成。 ECD包含一个N端Ig样结构域，一个细胞因子受体同源结构域和三个纤连蛋白III型结构域。 人G-CSF R的可变剪接产生其他同种型，包括受体的潜在可溶形式。 小鼠和人G-CSF R的ECD具有63％的氨基酸序列同一性。 G-CSF R与配体以2：2的比例形成复合物。 它在单核细胞，嗜中性粒细胞，巨核细胞，血小板，骨髓祖细胞，滋养细胞和胎盘，内皮细胞和各种肿瘤细胞类型上表达。

G-CSF是体内粒细胞生成的重要调节剂，G-CSF R中的突变与先天性中性粒细胞减少有关。 G-CSF可以支持多系造血祖细胞的生长，并将其从骨髓动员到血液中。 G-CSF通过限制细胞凋亡率来增强成熟中性粒细胞的功能能力并支持其生存。 G-CSF还增强了造血祖细胞引起的M-CSF诱导的单核细胞生成，并刺激了外周诱导Th2的树突状细胞的增殖。 它促进心肌梗塞和脑缺血后T细胞免疫耐受的发展以及组织恢复。 Human G-CSF免疫测定法是一种3.5-4.5小时的固相ELISA，旨在测量细胞培养上清液，血清和血浆中的人G-CSF。 它包含大肠杆菌表达的重组人G-CSF和针对重组蛋白的抗体。 已显示可准确定量重组人G-CSF。 使用天然人G-CSF获得的结果显示线性曲线与使用试剂盒标准获得的标准曲线平行。 这些结果表明该试剂盒可用于确定天然人G-CSF的相对质量值。