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  • PCR 扩增试剂盒

PCR 扩增试剂盒

150 50T 起订
北京 更新日期:2024-08-15

金克隆(北京)生物技术有限公司

VIP2年
联系人:张涵铭
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产品详情:

中文名称:
PCR 扩增试剂盒
保存条件:
-20℃
产品类别:
分子生物学
货号:
RE0225

PCR 扩增试剂盒

货号:RE0225

规格:50T/100T

保存:-20℃

试剂盒组成:

组分

50次

100次

Taq DNA Polymerase (5 U/μl)

25μl

50μl

10× Taq Buffer without MgCl2

300μl

600μl

dNTP (10 mmol/L)

60μl

120μl

MgCl2 (25 mmol/L )

1.0ml

1.0ml

Sterilized ddH2O

2.0ml

4.0ml

 

 

 

 

 

产品说明:

Taq DNA Polymerase 是从克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为 94 KD。该酶具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’核酸外切酶活性,无 3’-5’外切酶活性。在 PCR 反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为 1-2 kb/分钟,产物 3’端带A,可直接用于 T/A 载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组 DNA 的污染,稳定性好,特异性强。

使用本试剂盒快速简便,可用于PCR相关的实验室工作。

影响PCR反应的因素很多,即使使用经高度优化的PCR Master 也会遇到问题。如果发现PCR反应没有得所需产物或条带较弱,建议用25mmol/L MgCl2 调节反应体系中的Mg2+浓度,以期获得更好的结果。

使用方法:

1. 模板DNA准备:基因组DNA,反应体系中模板浓度推荐范围1-10 μg/ml;质粒或噬菌体DNA浓度0.1-1ng/ml。

2. 在无菌洁净的PCR管中,参考下面体系配制反应溶液。

试剂

终浓度

50μl体系

Sterilized ddH2O

-

补足

10× Taq Buffer without MgCl2  

5μl

dNTP Mix

0.2mmol/L

1μl

Primer 1

0.1~1μmol/L

x

Primer 2

0.1~1μmol/L

x

Taq DNA Polymerase

1.25 U

x

MgCl2

1~4mmol/L

x

模板 DNA

10 pg-1μg

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. 轻轻混匀后短暂离心。

注:在同时进行几个平行反应时,在一个离心管中将单组分混合均匀,分装到 PCR 管中,再依次加入 MgCl2和模板 DNA。

4. 加适量的矿物油后,置于 PCR 仪中进行 PCR 反应。

注:对于有热盖的 PCR 仪可不加矿物油。

 

5. PCR反应循环设置

94℃     3min

94℃     30sec

55℃     30sec            30 cycles

72℃   500-2000bp/1min

72℃     5min

6. 结果检测:反应结束后,取5μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。

注意事项:

1. PCR 能够从很少量的分子开始获得超过 1 千万拷贝数的目标 DNA 序列。其敏感性要求模板不能被实验室环境中其他 DNA 或以前的扩增产物所污染。

2. DNA 模板的准备,反应混合物的调配,PCR 反应过程以及随后的产物分析都应在不同的地方分开操作。

3. 建议使用带有紫外灯的超净台来混合反应混合物。每一步PCR 操作都应该使用新的手套。

4. 要求 PCR 反应所需试剂分开配制。

5. 溶液应分装成小计量单位并保存在指定存放 PCR 试剂的地方。试剂应该与其他 DNA 模板分开存放。

6. 为了确定无污染,应该同时做一个不含 DNA 模板的标准反应。

7. 50 µl 体系不同浓度 Mg2+所需 MgCl2 溶液体积:

Mg2+终浓度 (mmol/L)

1

1.5

2

2.5

3

4

MgCl2的体积 (μl)

2

3

4

5

6

8

8. 本产品仅供科研使用。

RE0010

无菌去离子水(PCR级)

RE0061

dNTPs Mix(2.5mM each)

RE0062

dNTPs Mix(10mM each)

RE0063

dNTPs Mix(25mM each)

RE0070

4×dNTPs(100mM)

RE0081

dATP(100mM)

RE0082

dTTP(100mM)

RE0083

dCTP(100mM)

RE0084

dGTP(100mM)

RE0110

Taq DNA Polymerase(含10x PCR buffer,预混氯化镁)

RE0120

Taq Plus DNA Polymerase(含10x PCR buffer,预混氯化镁)

RE0130

Pfu DNA Polymerase(含10x PCR buffer,预混氯化镁)

RE0140

Super-High-Fidelity DNA Polymerase 高保真快速DNA聚合酶

RE0210

2×Taq PCR MasterMix (含染料)

RE0211

2×Taq PCR MasterMix (不含染料)

RE0220

2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)

RE0221

2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料)

RE0225

PCR 扩增试剂盒

RE0230

2×Pfu PCR MasterMix (含染料)

RE0231

2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)

RE0250

血液直接扩增试剂盒

RE0401-250ul

通用引物 Random(10uM)

RE0416-250ul

通用引物 Oligo dT16(10uM)

RE0421-250ul

通用引物 T7(10uM)

RE0422-250ul

通用引物 T3(10uM)

RE0423-250ul

通用引物 SP6(10uM)

RE0424-250ul

通用引物 27F(10uM)

RE0425-250ul

通用引物 1492R(10uM)

RE0426-250ul

通用引物 ITS1(10uM)

RE0427-250ul

通用引物 ITS2(10uM)

RE0428-250ul

通用引物 ITS4(10uM)

RE0429-250ul

通用引物 ITS5(10uM)

RE0510

通用反转录试剂盒(M-mLV,不含Taq酶) cDNA 合成试剂盒

RE0511

通用RT-PCR试剂盒(M-mLV)

RE0520

通用RT-PCR试剂盒(AMV)

RE1010

SYBR Green I(PCR级,10000X)

RE1011-1000ul

SYBR Green I(PCR级,20X)

RE1110

Hot Start Taq DNA Polymerase 热启动Tap DNA 聚合酶

RE1120

Bst DNA 聚合酶,大片段

RE1121

Bst DNA 聚合酶,全长

RE1210

新型2×SYBR Green PCR Mastermix

RE1220

2×Taqman PCR MasterMix

RE1221

ROX参比染料

RE1230

2×SYBR Green PCR Mastermix  

RE1310

One Step RT-PCR Kit

RE1320

TaqMan One Step RT-qPCR Kit

 

 

 

 

 

 

PCR;聚合酶链式反应;Taq 酶

公司简介

金克隆生物公司位于北京经济技术开发区,主要从事生物医药试剂的研发和生产,并兼营部分生化试剂和仪器耗材,主营方向有细胞生物学、分子生物学、蛋白与免疫、组织学、微生物培养等相关试剂与耗材。库存现货10000多种,其中我公司自主开发的分子生物学试剂、细胞培养及检测试剂、分子免疫学产品等在质量和价格方面具有较大的市场优势,欢迎广大经销商洽谈合作。

成立日期 (8年)
注册资本 216万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 1000万-5000万
经营模式 贸易,工厂,试剂,定制,服务
主营行业 生物化工,染料及颜料,化学试剂,医药原料

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