免DNA提取PCR试剂盒（PCR直扩试剂盒）

免DNA提取PCR试剂盒（PCR直扩试剂盒）

产品及特点本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行 PCR 扩增的试剂盒，它具有下列特点:

1. 操作简单，免去 DNA 提取、蛋白去除、RNA 去除等步骤，15 分钟即得用于 PCR的模板，一个实验员每天可以筛选上千个样品，尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。

2. 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品（包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和 FTA 卡）、石蜡组织切片等。

3. 成本低廉，从提取到 PCR 处理每个样品的成本才一元左右，在大模筛选时能节约成本。

4. 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。

5. 本试剂盒足够处理 400 份样品，足够 400 次 20uL 体系的 PCR。
规格及成分 成 份 编 号 十孔盒包装
免提 PCR 溶液 A 成分一 LM130985a 400 μL(白色盖)
免提 PCR 溶液 A 成分二 LM130985b 800 μL(绿色盖)
免提 PCR 溶液 B LM130985c 1 mL×4(红色盖)
PCR MagicMix 3.0，2× 90805 1 mL×4(黄色盖)
使用手册 130985sc 1 份

运输及保存 低温运输，溶液 A 成分一和成分二、溶液 B 可以常温放置，PCR MagicMix 3.0 需要-20℃保存。有效期一年。

自备试剂 PCR 引物和模板，超纯水

使用方法1. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液（足够 10 个样品）为例：在一干净塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水，充分混合均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置，但好在一周内用完，不要长期放置。一次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液，1mL 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字，配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。

2. 根据材料不同参考下表取少量样品到一干净的塑料离心管中。

样品种类 取用量

动物组织 1-5 mg

鼠尾 2mm 长

血液样品 不超过 20 uL

植物叶片 1-5 mg

植物种子（去皮） 1-5 mg

酵母培养物 0.2-0.5mL 培养物沉淀

细菌培养物 0.2-0.5mL 培养物沉淀

注意：未列出样品，用户需要自己摸索用量。对富含多醌多酚的植物材料（如棉花），

组织使用量不要超过 0.5mg。

3. 加入 100 uL 溶液 A 工作液，确保样品被溶液淹埋。

4. 95℃保温 10 分钟。

5. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得细胞裂解液。

6. 直接用裂解液作为模板设置 30 uL 体系的 PCR 反应体系如下：

成分 用量

PCR MagicMix 3.0 10 uL

细胞裂解液（来于上步） 1-2 uL

自备 PCR 引物 1（10uM） 1 uL

自备 PCR 引物 2（10uM） 1 uL

补水到 20 uL

注意：裂解液体积不要超过 PCR 体积的 1/10。

7. 放入 PCR 仪中进行 PCR，PCR 参数需要根据引物 Tm 值和靶分子长度等参数设

置。一般不低于 35 次循环。

8. PCR 结束后取 5-10 uL 直接上样电泳（本产品不需要上样液即可直接上样），红色染料电泳速度相当于 50 bp DNA 片段。

9. 如果没有预期的扩增，细胞裂解液中可能是有 PCR 抑制剂（植物、土壤和血液等DNA 样品常含此类抑制物），建议把细胞裂解液分别稀释 10 倍和 100 倍再用 3uL进行 PCR 扩增。也可以在 PCR 体系中加入 1/10 的本公司的 PCR 抑制物清除剂（CAT#：60804，30uL 体系中加 3uL。需要另购），可能会对 PCR 有帮助。