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高效RIPA裂解液 /细胞快速裂解液

RIPA buffer(high)
60 20ml 起订
150 100ml 起订
北京 更新日期:2024-08-15

金克隆(北京)生物技术有限公司

VIP2年
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产品详情:

中文名称:
高效RIPA裂解液 /细胞快速裂解液
英文名称:
RIPA buffer(high)
保存条件:
RIPA裂解液4℃保存,PMSF -20℃保存,有效期1年
产品类别:
免疫 抗体
货号:
EX6010

高效RIPA组织/细胞裂解液使用说明书

货号:EX6010                             

规格:20mL/100mL

本产品配有一支PMSF(100mM,1.5mL)

保存:RIPA裂解液4℃保存,PMSF -20℃保存,有效期1年。

使用说明:

如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。

根据使用量,取每1mL RIPA加入10uL PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用(PMSF现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250uL裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250uL裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。

注意事项:

本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,若细胞量多会造成细胞裂解液粘稠:此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可加入少量 SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。

如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。

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RIPA;蛋白裂解液;

公司简介

金克隆生物公司位于北京经济技术开发区,主要从事生物医药试剂的研发和生产,并兼营部分生化试剂和仪器耗材,主营方向有细胞生物学、分子生物学、蛋白与免疫、组织学、微生物培养等相关试剂与耗材。库存现货10000多种,其中我公司自主开发的分子生物学试剂、细胞培养及检测试剂、分子免疫学产品等在质量和价格方面具有较大的市场优势,欢迎广大经销商洽谈合作。

成立日期 (8年)
注册资本 216万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 1000万-5000万
经营模式 贸易,工厂,试剂,定制,服务
主营行业 生物化工,染料及颜料,化学试剂,医药原料

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