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  • 粗提酵母tRNA溶液A,5mg/mL

粗提酵母tRNA溶液A,5mg/mL

390 15mL 起订
上海 更新日期:2024-03-29

上海泽叶生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
粗提酵母tRNA溶液A,5mg/mL
保存条件:
常温运输和保存
纯度规格:
99.99%
产品类别:
分子生物学 探针标记及检测

粗提酵母tRNA溶液A,5mg/mL

 

产品及特点本产品分 A 和 B 两个纯度级别,浓度均为 5mg/mL。A 是酵母 tRNA 粗提液, 用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母 tRNA 的原材料或斑点杂交液添加成分。 B 是精提液,是经过本公司柱式 RNAclean 纯化的分子生物学级别的酵母 tRNA 溶 液,不含蛋白质和 DNA 污染,OD260/OD280 在 1.9 左右,可直接用作微量 RNA 提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern 杂交的封堵剂,对于探针 为 RNA 的杂交试验尤其适用。 
规格及成分 70904A 包装
成 份 编 号 塑料袋包装
tRNA 溶液粗提液 70904a 1.5 mL
使用手册 70904sc 1 份
70904B 包装
成 份 编 号 塑料袋包装
tRNA 溶液精提液 70904b 或 1.5 mL
使用手册 70904sc 1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年

自备试剂 根据情况 

使用方法 一:以 tRNA 粗提液(70904a)为材料,酚法制备 tRNA 精提液(70904b)

1. 在 1 倍体积的 tRNA 粗提液中加入一倍体积的自备 Tris 饱和酚,振荡混匀后 12000-15000 g 离心 3 分钟得上清。

2. 在上清中再加入一倍体积的自备 Tris 饱和酚和 0.2 倍体积自备的氯仿,振荡 混匀后 12000-15000 g 离心 3 分钟得上清。

3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要 2-4 次抽提。

4. 在上清中加入 0.1 倍体积的自备 3M NaAc(pH5.2)和 2 倍体积的自备无水 乙醇,振荡混匀。

5. 12000-15000 g 离心 15 分钟以上,小心移弃上清。

6. 用 1mL 自备 75%乙醇洗一次(即加入 1mL 75%乙醇,振荡混匀后 12000-15000 g 离心 5 分钟,小心移弃上清)。

7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母 tRNA,可以溶 解在自备的 DEPC 水中,UV 测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。 注意:tRNA 比较短,又是单链,所以电泳时结合 EB 等染料的能力很弱,测 定其浓度时好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。

注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时 沉淀下来。如果后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式 RNAclean 精提,详 细过程见该产品使用手册。 

二:tRNA 精提液(70904b)作为核酸助沉剂

1. 在核酸(DNA 或/和 RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓 度也不相同,具体如下: 盐 终浓度 NH4OAc (醋酸铵) 0.5 M NaCl (氯化钠) 0.25 M NaOAc (醋酸钠) 0.3 M 2. 加入本产品使其终浓度为 20 ug/mL,混合均匀。

3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。

4. 冰上放置 15 分钟。

5. 12000-15000 g 离心 15 分钟以上,小心移弃上清。

6. 用 1mL 75%乙醇洗一次(即加入 1mL 75%乙醇,振荡混匀后 12000-15000 g 离心 5 分钟,小心移弃上清)。

7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。

8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。

注:由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的 DNA 或 RNA 要用于此类反应,就不能使用 tRNA 作为助沉剂。如果回收的 RNA 要用于 RT-PCR,使用 tRNA 可能会对反应的特异性产生干扰。

二:tRNA 精提液(70904a 或 70904b)作为杂交封堵剂

tRNA 粗提液可以作为菌斑杂交液的封堵成分,tRNA 精提液可以作为原位杂 交液、Northern 杂交液和 RNA 斑点杂交液的封堵剂,也可以作为 Southern 杂 交液和 DNA 斑点杂交液的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交 液中的终浓度为 100ug/mL。如果使用 RNA 探针,好使用 tRNA 精提液做封堵 剂,以保护 RNA 探针。 

 

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公司简介

上海泽叶生物科技有限公司是一家服务于生命科学领域的高新技术企业,主要为科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学、材料科学,通用试剂、药物合成试剂、手性化合物、催化剂及配体、分析试剂、生物试剂,检测试剂等等

成立日期 (8年)
注册资本 100万元整
员工人数 1-10人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 贸易,试剂,定制,服务
主营行业 生物化工,有机原料,化学试剂,医药原料,技术服务

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