LAMP扩增阳性对照

LAMP扩增阳性对照
产品及特点本产品为 LAMP 扩增专用的阳性对照，用于判断、分析 LAMP 等温扩增结果。LAMP 等温扩增，即 Loop-Mediated Isothermal Amplification（环介导等温扩增），是 2000 年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4 条模板专一的特异引物和具有链置换能力的 DNA 聚合酶，在等温条件下63℃左右）30－60 分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于 PCR 技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂 LAMP Mix 、Bst DNA 聚合酶、MgCl2 溶液、超纯水等

使用方法 1. 在冰上溶解除酶外的各种组份，其中 LAMP Mix（2× ）、MgCl2（25 mM）和 Bst DNA 聚合酶（8 U/uL）等试剂自备（参照本公司产品 100203组分），混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：成份 阴性对照管 阳性对照管

LAMP Mix（2×） 10 uL 10 uL

对照引物混合物 4.0 uL 4.0 uL

对照模板 DNA 不加 1 uL

MgCl2（25 mM） 3 uL 3 uL

Bst DNA 聚合酶（8 U/uL） 1.5 uL 1.5 uL

水 1.5 uL 0.5 uL

2. 混匀，置于 60-65℃保温 120 分钟。

3. 80℃下保温 10 分钟灭活 Bst DNA 聚合酶。

4. 产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:

1) 琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物 5 uL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP 特征性电泳图谱；

2) 向扩增产物中直接加入本公司 PCR 级绿如蓝染料（另售）1 uL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；

3) 荧光定量检测。