First Strand cDNA Synthesis Kit for RT-PCR (AMV

General description

RNA的扩增需要将RNA底物转换为DNA。这一反应通过AMV RT（禽成髓细胞瘤病毒逆转录酶）或M-MuLV RT（莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶）等逆转录酶介导。所获得的cDNA可作为标准PCR的模板。
AMV RT合成cDNA链的起始位点，由所使用引物的类型决定：

• 使用oligo-p(dT)₁₅作为引物时，以poly（A) mRNA的3’端作为起始位点，
• 使用随机引物p(dN)₆时，在mRNA模板的非特异性位点起始
• 使用序列特异性引物时，在特定位点起始。

   

  使用AMV RT进行链cDNA合成具有某些优势。此酶比M-MuLV逆转录酶具有更高的热稳定性，允许反应在+42°C下进行，因而比+37°C的反应条件具有更高的特异性和对二级结构更好的解析能力。

  链cDNA合成试剂盒适用于链cDNA的合成反应，这一反应可作为两步法RT-PCR实验的起始步骤。本品能够兼容序列特异性的引物，poly(dT)₁₅引物，或随机引物。
  本试剂盒包含用于链合成的逆转录酶AMV，两条不同的引物，我们的PCR核苷酸混合物（PCR Nucleotide Mix）与Neo pa RNA对照品。RT-PCR反应生成的PCR产物可通过标准步骤实施分子克隆操作。