CTAB抽提液

名称 CTAB抽提液 / CTAB Extract Solution

规格 500mL

存储 Store at RT，有效期24个月

试剂组分 

试剂(A): CTAB抽提液----500ml---Store at RT

试剂(B): 2-ME----10ml----Store at RT away from light

自备材料：1、 液氮/研钵或匀浆器；2、 恒温箱或水浴锅；3、 氯仿/异戊醇24:1；4、75%乙醇；6、离心管；

产品简介 

CTAB是一种阳离子去污剂，具有从低离子强度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性，在这种条件下，蛋白质和中性多聚糖仍留在溶液里，在高离子强度的溶液里，CTAB与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。因此，CTAB可以用于从大量产生粘多糖的有机体如植物以及某些革兰氏阴性菌（包括E.coli的某些株）中制备纯化DNA 。

从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法，可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取，获得的量很高，但是纯度一般，但是足够用于大多数分子生物学实验。CTAB抽提液的有效成分主要由CTAB、氯化钠、EDTA等组成，附送 2-ME，临用前加入2-ME，使其更有效，更稳定。

使用参考 

1、 取5ml或适量CTAB抽提液，按CTAB抽提液：2-ME=50：1的比例混匀，置于15ml或其它规格的离心管中，60℃预热。

2、称取1.0~1.5g或适量新鲜植物组织或叶片，用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器，将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末，将冷冻的组织转移至离心管中。

3、向粉碎的组织中按4~5ml/g加入预热的CTAB抽提液，充分混匀，65℃温育15~60min，并不时混匀。

4、加入等体积24:1氯仿/异戊醇，颠倒充分混匀，8000g离心5min~10min，回收上层水相（即上清液，该上清液中含有所需DNA）。

5、转移上清液至新的离心管中，加入1/2~2/3体积预冷的异丙醇，轻轻混匀，室温静置使核酸沉至管底。如果观察不到沉淀，可在室温下静置数小时至过夜。

6、 2000g离心2min，轻轻弃上清液。

7、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇，室温静置20min，4000g离心10min，轻轻弃上清液。

8、自然干燥DNA，加入适量去离子水或TE缓冲液，低温保存。

注意事项 

1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

CTAB Extraction Buffer is a widely-used reagent used to isolate DNA from plant tissues.  Polysaccharides and polyphenols are problematic contaminants associated with DNA isolated from plants.  CTAB Extraction Buffer effectively eliminates polysaccharides and polyphenols by employing the cationic detergent CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide or cetyltrimethylammounium bromide), and the polyphenol binding agent, Polyvinylpyrrolidone. 

Traditional CTAB protocols typically require the homogenization of plant samples in CTAB Extraction Buffer prior to centrifugation to pellet debris and polysaccharides. The supernatant is then extracted using chloroform, and DNA is precipitated with alcohol.  Isolated DNA is typically very clean.

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