基本信息 产品详情 公司简介 推荐产品
网站主页 化工产品目录 生物 蛋白与多肽 蛋白样品制备 裂解及蛋白抽提 NP-40裂解液 NP-40裂解液
  • NP-40裂解液
  • NP-40裂解液
  • NP-40裂解液

1/3

NP-40裂解液

NP-40 Lysis Buffer
询价 100ml 起订
湖北 更新日期:2024-03-08

武汉卡诺斯科技有限公司

VIP5年
联系人:代翔
电话:027-83238443拨打
手机:15327105076 拨打
邮箱:926254131@qq.com

产品详情:

中文名称:
NP-40裂解液
英文名称:
NP-40 Lysis Buffer
保存条件:
干燥通风
纯度规格:
99%
产品类别:
试剂
货期:
现货

名称 NP-40裂解液 / NP-40 Lysis Buffer
规格 PH1421-100 | 100mL
存储 冰袋运输,-20℃保存
有效期:至少12个月
试剂组份 
试剂A:NP-40 Lysis Buffer----100ml----Store at -20℃
试剂B:PMSF(100mM)----1.5ml----Store at -20℃
产品简介 
NP-40 Lysis Buffer主要由Tris-HCl、NaCl、NP-40等组成。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
NP-40裂解液 (NP-40 Lysis Buffer)是采用一种温和的裂解方法获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于PAGE电泳、Western、免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
使用说明 
(一)贴壁培养细胞
1.取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀,加入PMSF,使PMSF终浓度为1mM。例如取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。
2.去除贴壁细胞的培养液,用PBS、NS或无血清培养液清洗1次,低速离心,弃上清,留取沉淀。
3.按照6孔板每孔加入150~250μl含有PMSF的裂解液的比例,加入NP-40 Lysis Buffer 。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或4℃裂解15~30min,通常裂解液作用于细胞1~3s内,细胞就会被裂解。
4.10000~12000g,4℃离心5~10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
5.进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1.取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀,加入PMSF,使PMSF终浓度为1mM。低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。
2.用手指轻弹细胞,使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150~200μl含有PMSF的裂解液的比例,加入NP-40 Lysis Buffer。通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200~250μl。再用手指轻弹以充分裂解细胞,充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
3.10000~12000g,4℃离心5~10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
4.进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本
1.取NP-40 Lysis Buffer 置于室温溶解混匀,加入PMSF,使PMSF终浓度为1mM。把组织剪切成细小的碎片,越小越好。
2.取在液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织,迅速用液氮研磨,研磨过程尽量控制在1~2min之内,以减少蛋白的降解。
3.按照每20mg组织加入150~250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或4℃裂解30~60min。
4.步骤3、4亦可以采用如下过程:按照每20mg组织加入150~250μl裂解液的比例,加入含有PMSF的NP-40 Lysis Buffer。用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆,直至充分裂解,该过程尽量控制在1~2min之内,以减少蛋白的降解。
5.10000~12000g,4℃离心5~15min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
6.进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
注意事项 
1)在贴壁培养细胞的操作步骤中,去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
2)如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
3)在培养细胞的裂解中,如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
4)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈Vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5)溶解NP-40 Lysis Buffer时,应尽量缩短溶解时间,避免裂解液中的有效成分失效。
6)细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或4℃进行。
7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
*Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
我们所提供的产品仅供科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或者化妆品等用途!在您向我们订购产品之时,表明您已经知晓我们的产品仅做科研用途,并遵守法律法规!

NP-40裂解液厂家,NP-40裂解液价格,NP-40裂解液现货

公司简介

武汉卡诺斯科技有限公司旗下子公司武汉富鑫远科技有限公司在污水治理及水处理产品方面也取得了长足的发展,承包多个污水处理项目,PAM、PAC畅销全国多个省市自治区,在国内形成了稳定健全的销售网络体系。公司于东西湖区、舵落口、盘龙城设有大型仓库,长期保持充足的货源库存。与宜昌宜化、巴陵石化、应城双环、新都化工、雪花啤酒、百威啤酒、武钢、冶钢、鄂钢、葛化、鄂西化工厂、广济药业等大型企业有长期业务往来。_ 本公司始终奉行“守约重义,精诚服务,持续改进,为顾客提供优质产品”的质量方针,立志于向客户提供高质量的产品及优质的服务。真诚欢迎海内外客户来洽谈贸易,合作经营,共创辉煌!

成立日期 (8年)
注册资本 500万
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 500万-1000万
经营模式 工厂
主营行业 无机化合物,合成材料中间体,催化剂,有机膦化合物 ,有机合成试剂

NP-40裂解液相关厂家报价 更多

内容声明
拨打电话 立即询价