氮自由基(DPPH)清除能力测试试剂盒
（A001-96T 酶标板法）

一.测定原理

DPPH自由基是一种较稳定的含氮自由基，有一个单电子，在517nm下有强吸收，如果有其他物质提供一个电子使此单电子配对，其吸收会消失褪色，褪色程度与接受电子的量呈正比。即反应物清除氮自由基的能力与试剂在517nm的吸光值成反比。

二.试剂组成

试剂一：DPPH试剂100μL支

试剂二：100μg/mL 维生素C标准溶液 1ml×1支

三.储存条件及有效期

试剂盒-20℃可保存6个月。

四.试剂的配制

试剂一：37℃平衡20min以上，待试剂融化后，在试剂瓶中加入10ml 95%乙醇或无水乙醇，剧烈震荡使试剂充分溶解。

注意：溶解一定要充分，如有条件可采用超声波助溶。

试剂二应用液：根据是否需要制作阳性对照标准曲线有两种配制方法。

1. 如仅需要将维生素C作为质控品，可取100μL 试剂二，加入900μL样品稀释液，充分混匀，配制成10μg/mL 维生素C；

2. 如需测定维生素C的IC₅₀，可分别移取0，2，5，10，15，20，25，30，40，50μL 试剂二于空离心管中，再依次加入100，98，95，90，85，80，75，70，60，50 μL样品稀释液，充分混匀。配制成0，2，5，10，15，25，30，40，50 μg/mL 维生素C样品。

五.操作步骤

充分混匀，室温避光静置30min使之充分反应。517nm处采用酶标仪测定吸光值。