Tubastatin A (HDAC抑制剂)

化学名

N-hydroxy-4-[(2-methyl-3,4-dihydro-1H-pyrido[4,3-b]indol-5-yl)methyl]benzamide

简称

Tubastatin A

别名

Tubastatin-A, Tubastatin A BASE

中文名

N/A

化学式

C₂₀H₂₁N₃O₂

分子量

335.4

CAS号

1252003-15-8

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO9mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.49ml DMSO，或者每3.35mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SD1155-10mM用DMSO配制。

产品描述

Tubastatin A是一种有效的，选择性HDAC6抑制剂，无细胞试验中IC50为15nM，选择性远高于所有其他同工酶(1000倍)除了HDAC8(57倍)。

信号通路

Epigenetics; DNA Damage; NF-κB

靶点

HDAC6

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IC50

15nM

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体外研究

Tubastatin A选择性作用于所有同工酶除了HDAC8，对所有亚型不含HDAC8，保持超过1000倍的选择性，对HDAC8具有约57倍的选择性。2.5μM Tubastatin A优先诱导α-tubulin 高度乙酰化。10μM Tubastatin A轻微诱导组蛋白乙酰化。Tubastatin A 5μM开始对同型半胱氨酸诱导的神经元细胞死亡具有保护作用，这种作用具有剂量依赖性，10μM时，达到完全保护。Tubastatin A (10μM)作用于胆管癌细胞系，诱导乙酰化的α-tubulin水平增加和初级纤毛表达的恢复，初级纤毛表达的恢复与下调Hedgehog (Hh)和MAPK信号通路，以及减少细胞增殖率(平均50%)和浸润(40%)相关。Tubastatin A作用于LPS刺激的人类THP-1巨噬细胞，显著抑制TNF-α和IL-6，IC50分别为272nM和712nM。Tubastatin A作用于小鼠Raw 264.7巨噬细胞，抑制一氧化氮(NO)分泌，这种作用具有剂量依赖性，IC50为4.2μM。

体内研究

Tubastatin A降低体内胆管癌的生长。Tubastatin A(10mg/kg)处理同基因大鼠原位胆管癌模型，诱导低于平均瘤重6倍，降低肿瘤重量与肝脏重量和体重(分别为5和5.6倍)的比值。Tubastatin A处理肿瘤，与对照组相比，显著降低PCNA阳性细胞的量(34% vs 65%)。Tubastat A按30mg/kg剂量腹腔注射给药弗氏完全佐剂(FCA)诱导的动物炎症模型，显著抑制鼠爪体积。Tubastat A(30mg/kg 腹腔注射)处理胶原诱导型关节炎DBA1小鼠的爪子组织，显著降低临床评分(~70%)和IL-6表达。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

Tubastatin A在实验Buffer(50mM HEPES，pH 7.4，100mM KCl，0.001% Tween-20，0.05% BSA和20μM tris(2-carboxyethyl)phosphine)中溶解和稀释到终浓度的6倍。HDAC酶在实验Buffer中稀释到终浓度的1.5倍，与Tubastatin A预温育10分钟，然后加入底物。通过滴定曲线测得，用于每种酶的FTS(HDAC1、HDAC2、HDAC3和HDAC6)或MAZ-1675(HDAC4、HDAC5、HDAC7、HDAC8和HDAC9)量等于米氏常数(Km)。使用0.3μM测序级胰蛋白酶将FTS或MAZ-1675在实验Buffer中稀释到终浓度的6倍。底物/胰蛋白酶混合物加入到酶/化合物混合物中，震荡实验板60秒，然后置于SpectraMax M5酶标仪上。赖氨酸侧链在肽底物中脱乙酰化后，监测酶促反应的7-amino-4-methoxy-coumarin释放，监测30分钟，计算反应的线性速率。

细胞实验

细胞系

人体胆管癌细胞系HuCCT-1

浓度

~10μM

处理时间

21天

方法

细胞生长在软琼脂中，测评锚定非依赖性生长。约25000个细胞悬浮在培养基的0.4%琼脂中，超过1%琼脂层在6孔板中。每周加入两次培养基，温育21天，拍摄图片。使用Gel-Pro软件分析菌落的数量和尺寸。

动物实验

动物模型

携带胆管癌移植瘤BDEneu的大鼠

配制

N/A

剂量

10mg/kg

给药方式

每天腹腔注射

产品编号

产品名称

包装

SD1155-10mM

Tubastatin A (HDAC抑制剂)

10mM×0.2ml

SD1155-5mg

Tubastatin A (HDAC抑制剂)

5mg

SD1155-25mg

Tubastatin A (HDAC抑制剂)

25mg

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说明书

1份