基本信息 产品详情 公司简介 推荐产品
网站主页 化工产品目录 生物 基因 DNA提取与纯化 基因组提取 土壤基因组DNA提取试剂盒 土壤基因组DNA提取试剂盒
  • 土壤基因组DNA提取试剂盒

土壤基因组DNA提取试剂盒

询价 50次 起订
北京 更新日期:2024-12-08

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司

非会员
联系人:瑞泰
电话:010-58437227拨打
手机:4006990631 拨打
邮箱:real-times@vip.163.com

产品详情:

中文名称:
土壤基因组DNA提取试剂盒
产品类别:
基因提取 DNA纯化

土壤基因组DNA提取试剂盒目录号:RTG2403)      

试剂盒内容及保存:

试剂盒组成

RTG2403

50次)

贮存方式

缓冲液R1

40 ml

常温

缓冲液R2

6 ml

常温

缓冲液R3

6 ml

常温

缓冲液R4

10 ml

常温

缓冲液 R5(浓缩液)

15 ml

常温

漂洗缓冲液WB1

30 ml

常温

漂洗缓冲液PW (浓缩液)

13 ml

常温

洗脱缓冲液EB

15 ml

常温

Glass beads

20 g

常温

吸附柱CG

50个

常温

收集管(2 ml)

50个

常温

说明书

1份

 

 

 

储存条件和效期:

本试剂盒在室温(25℃左右)干燥条件下,可保存1年。缓冲液R2和R3可能有沉淀产生,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。

产品简介:

土壤样品存在大量的抑制因子如腐殖酸、金属离子等,而纯化的DNA 中只要有这些微量物质的存在,都会影响到PCR等酶促反应。本公司的土壤试剂盒采用独特的腐殖酸去除液(缓冲液R2)能够有效去除腐殖酸;吸附柱CG能能有效去除金属等抑制因子,提纯得到的基因组DNA可直接用于PCR 反应,酶切或定量实验。

准备工作:

1. 准备55℃,70℃水浴;无水乙醇;异丙醇;制冰机;1.5ml离心管;2ml离心管

2. 按照标签所示在漂洗缓冲液PW中加入无水乙醇;缓冲液R5中加入异丙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。

3. 每次使用前请检查缓冲液R2,缓冲液R3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

标准操作步骤:

如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1. 0.3-0.5 g土壤置于2ml离心管中,加入0.4 g Glass Beads,再加入700 μl 缓冲液R1100 μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5min

注意:对含水量丰富的样品,可以预先离心除去部分水分后再称取样品。缓冲液R2是腐殖酸去除剂,100μl对大部分样品来说足以有效除去腐殖酸等抑制因子。对一些腐殖酸含量特别丰富的土壤, 缓冲液R2的量可以适当增加,但不能超过250μl,否则会严重影响DNA的得率。

2. 加入100 μl 缓冲液R3R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用),涡旋混匀。 70℃水浴处理10min。期间振荡几次。

   注意:如果要纯化革兰氏阳性菌的DNA,请在70℃处理完后,再90℃水浴处理2min。

3. 12000 rpm(~13,000g)离心1分钟,取600μl上清到1.5ml离心管中,加入180 μl 缓冲液R4混匀。

注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。

4. 冰上放置5分钟。12000 rpm(~13,000g)离心1分钟。 转移上清到新的1.5ml离心管中。

注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量不超过80%。

5. 加入与上清等体积的缓冲液R5(使用前请检查是否已加入异丙醇),颠倒混匀。

6. 750 μl混合液加到吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000 rpm(~13,000g)离心30秒,倒掉滤出液。

7. 将剩余的混合液加到吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13,000g)离心30秒,倒掉滤过液。

8. 向吸附柱CG中加入500μl 漂洗缓冲液WB112,000 rpm (~13,000×g )  离心30 秒,倒掉废液。

9. 向吸附柱CG中加入600μl 漂洗缓冲液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)12,000 rpm (~13,000g) 离心30 秒,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。

10. 向吸附柱CG中加入600μl漂洗缓冲液PW12,000 rpm (~13,000g) 离心30秒,倒掉废液,将吸附柱CG放入收集管中。

11. 12,000 rpm(~13,000g)离心2分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。

:此步骤非常重要,其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。

12. 将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100 μl70水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm(~13,000g)离心2分钟。

; = 1 \* GB3 ① 洗脱缓冲液体积不少于50 μl,体积过小影响回收效率。

= 2 \* GB3 ② 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。

13. DNA产物-20保存。

 

大量操作步骤(针对含微量核酸的样品)

1. 1-5g土壤置于10ml离心管中,加入1g Glass Beads,再加入3ml 缓冲液R1200μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5分钟。

2. 加入600μl 缓冲液R3,涡旋混匀。70水浴处理10分钟。期间振荡几次。

3.3000g离心3分钟,转移上清到新的离心管中,加入550μl 缓冲液R4混匀。

4. 冰上放置5分钟。8000g离心10分钟。转移上清到新的离心管中。

5. 以下按标准操作步骤的第五步继续操作。

 

DNA浓度及纯度检测:

基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。

土壤基因组DNA提取试剂盒_DNA提取_DNA纯化_

公司简介

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司成立于2006年,是一家致力于产品研发、试剂销售、技术服务为一体的生物技术企业。公司秉承“以人为本,诚信至上”的服务理念,依靠客户的大力支持和我们的不懈努力获得了快速的发展。 公司组织结构清晰,内部管理科学,拥有一支配备合理的年轻化队伍,充分保障了公司的研发能力和在竞争日益激烈的市场中占据一席之地。 我们深知一颗幼苗的萌发和成长不仅需要我们坚强的信念和持久的毅力,更离不开广大用户的呵护和培养,是广大客户给了我们广阔的成长和发展空间,使这颗幼苗得以抽枝展叶,继而繁茂生长。在这里,请广大客户接受我们最为诚挚的谢意!我们也承诺将为你们提供最为优质的产品和最为优良的

成立日期 (19年)
注册资本 10.000000万人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易,工厂,试剂,定制,服务
主营行业 细胞培养,蛋白组学,分子生物学,免疫安全,生物芯片

土壤基因组DNA提取试剂盒相关厂家报价 更多

内容声明
拨打电话 立即询价