TdT末端转移酶

末端转移酶（TdT）是一种不依赖于模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3’羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物，加尾长度可达5~300nt。该末端转移酶（TdT）分子量为58.3 kDa，无5’和3’核酸外切酶活性，反应中加入Co²⁺可提高加尾效率。该酶广泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修饰碱基（如ddNTP，DIGdUTP）标记DNA 3’末端、TdT介导的dUTP 缺口末端标记技术（细胞凋亡的原位检测）等试验。该酶经检测无DNA内切酶和外切酶污染，不含RNase。

组分

应用

• 寡核苷酸或DNA 3’羟基末端标记
• DNA末端加尾(DNA tailing)
• 5’-RACE
• 合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链

活性定义

37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位

1×TdT Buffer

100mM KCl, 30mM Tris-acera, 0.05% (v/v) Triton X-100 (pH 7.5 at 25 °C)

储存

-20℃可保存3年。

热失活

75°C 20min。

注意事项

1、适量EDTA可使Terminal Transferase的活性丧失。
2、金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘例子和磷酸根离子均对Terminal Transferase活性具有抑制作用。