Proteinase K 蛋白酶K（分子生物学级）

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

搜索关键词

Proteinase K；蛋白酶K（分子生物学级）；Endopeptidase K内肽酶K；DNase I脱氧核糖核酸酶I；RNase A核糖核酸酶A；CAS NO：39450-01-6；

产品描述

蛋白酶K，英文名Proteinase K，一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，pH 4-12的宽广范围内均有活性，SDS、尿素或EDTA存在条件下也很稳定。相对分子量约29.3kDa，能够切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，用于生物样品内蛋白质的降解。

蛋白酶K基因来自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)，通过酵母重组表达所得，达分子生物学级别。蛋白酶K应用广泛，主要用于去除DNA和RNA制备中的核酸酶，也可用于非蛋白组分制备体系内降解蛋白质杂质，比如DNA疫苗制备、肝素制备等。还可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹实验。本品常用工作浓度为50-100µg/ml，根据缓冲体系是否含SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

产品特性

1）   CAS NO：39450-01-6

2）   E.C. NO：3.4.21.64

3）   来源：基因来源林伯氏白色念球菌，酵母重组表达

4）   纯度：≥95%，经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA，检测不到其它杂酶活性。

5）   pH范围：4.5-12.0，通常使用pH范围是7.5-9.0

6）   温度特征：在70℃活性，建议使用温度范围37-70℃

7）   比活力：≥34U/mg protein

8）   单位定义：在37℃，pH7.5的条件下，每分钟水解酪蛋白生成1µM酪氨酸时需要的酶量，定义为1个活性单位。

9）   激活剂：1-5mM Ca2+【为了活化蛋白酶K活性，加入1-5mM Ca2+。用激活剂优化实验条件能明显增加酶活性。当加入EDTA去除体系内Ca2+会降低酶活性。】

10）抑制剂：PMSF或DFP（酶可用DFP或PMSF失活，PMSF终浓度5mM。）

11）质量控制：a）以λ DNA为底物，37ºC消化4小时以上，未检测到脱氧核糖核酸酶活性。b）以λ DNA为底物，25ºC消化16小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。

12）消光系数：E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

13）稀释缓冲液：推荐 20 mM Tris-HCl (pH 7.4)，1mM CaCl2

14）储存缓冲液：20 mM Tris-HCl (pH 7.4)，1mM CaCl2，50% Glycerol

保存与运输方法

保存：冻干粉+4℃密封干燥保存，一年有效；-20℃密封干燥保存，三年有效。

运输：冻干粉室温运输。

注意事项

1）   本蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种，pH活性范围4-12，温度范围为0-75℃，甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。

2）   蛋白酶K粉末并非无菌，需要长期保存后使用或要求实验必须无菌，请务必过滤除菌处理。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制方法

1）   先将蛋白酶K粉末溶于稀释缓冲液【20 mM Tris-HCl (pH 7.4)，1mM CaCl2】或其他缓冲液配制成40-80mg/ml原液，用0.22 µm低蛋白吸附的PES或PVDF滤膜过滤除菌。

订购信息【现货供应，产品质量可媲美Merck 1.24568.0100（124568）】

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。