DNA-pulldown-Kit

技术特点

DNA-pulldown（DNA亲和捕获）是一种基于核酸亲和纯化的体外富集技术，用于鉴定或验证特定DNA序列与其结合蛋白的相互作用。

DNA-pulldown实验的核心思路是体外合成目标DNA序列探针并进行标记（主要为生物素），探针固定在链霉亲和素磁珠上后与细胞核裂解液或纯化蛋白孵育，使能够特异性结合该DNA序列的蛋白被捕获，经洗涤洗脱后获取与目标DNA序列结合的蛋白。

技术应用

（1）特定基因的转录调控研究，鉴定启动子/增强子/顺式作用元件上的结合蛋白，解析关键转录因子或辅因子复合物。<br>

（2）转录因子靶向结合特定基因的验证；<br>

（3）表观遗传与染色质调控研究，筛选与特定DNA序列相关的调控蛋白，并与ChIP等结果互相印证；<br>

（4）DNA修饰（m5C等）结合修饰酶、去修饰酶及读取酶研究

技术特点

（1）与ChIP/ChIP-seq相比，DNA-pulldown技术的切入点为DNA序列，通常用于在体外条件下对“某一特定的DNA序列能结合哪些蛋白”进行筛选或验证；而ChIP实验的切入点为特定的DNA结合蛋白，更强调细胞内背景下蛋白在基因组上的占位研究。<br>

（2）与EMSA相比，DNA-pulldown实验使用的探针区更长，常用于广泛区域的转录因子捕获；而EMSA通常使用较短的探针，通常用于DNA-蛋白质结合位点序列研究。通常先进行DNA-pulldown实验，确认DNA-蛋白质互作后，再通过EMSA实验进一步研究具体的结合位点。<br>

（3）与酵母双杂交、荧光素酶报告基因实验相比，DNA-pulldown是体外验证，也常用于前期研究中的复合物捕获发现，但实验结果结果可能引入非生理条件下的结合，对非特异吸附敏感，因此DNA-pulldown需要设置合理的对照，并把控洗涤洗脱条件。

产品优势

（1）非特异性低，优化磁珠对低丰度转录因子的研究更灵敏，且样本可批量进行实验；<br>

（2）操作简便，实验全程4h内；<br>

（3）含有适配Western Blot与适配蛋白质谱的洗脱液，产物可进行多种实验。