人牙龈成纤维细胞

人牙龈成纤维细胞

从健康供体牙龈成纤维细胞组织标本经机械分离与胶原酶 II 联合消化获取成纤维细胞，经差速贴壁法纯化后接种于纤维连接蛋白包被培养皿中，采用 DMEM/F12 完全培养基（含 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺及 1% 非必需氨基酸）维持培养；通过免疫荧光检测 FSP-1/S100A4、α-SMA（活化型）及 PDGFR-β 表达，Western blot 分析细胞外基质蛋白（胶原 I、纤连蛋白）分泌水平，确认成纤维细胞功能表型。

产品名称：人牙龈成纤维细胞

英文名称： Human Gingival Fibroblasts

组织来源： 牙龈组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人牙龈成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来。

质量检测  实验室分离的人牙龈成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人牙龈成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传3-5代左右

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人牙龈成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

冻存管 37℃水浴快速融解，残留微量冰晶取出。

酒精消毒管壁，超净台转移细胞悬液至离心管。

1000rpm 离心 5min，弃上清。

牙龈成纤维细胞完全培养基吹打重悬细胞沉淀。

计数，标准密度接种培养瓶，十字晃动混匀。

37℃、5% CO₂培养箱静置，24h 观察贴壁状态。

汇合至 80%，去除旧培养基，更换新鲜培养基，准备传代。

1.全程操作需在超净工作台内无菌条件下进行，任何污染风险均可能导致实验失败。

2.培养器皿需提前用0.1mg/ml多聚赖氨酸包被过夜，未包被的培养板细胞贴壁效率极低。

3.该细胞类型体外培养寿命有限，原代细胞通常在5-10代内出现衰老现象。

4.补充10ug/ml胰岛素、5ug/ml转铁蛋白和2nM三碘甲腺原氨酸(T3)。

5.建议传代比例为1:2，每2-3天更换新鲜培养基，维持细胞最佳生长状态。