大鼠腮腺细胞

大鼠腮腺细胞

运用胶原酶消化-差速贴壁联合策略从Sprague-Dawley大鼠腮腺细胞组织中分离纯化目标细胞，经 Percoll 密度梯度离心去除杂细胞后接种于纤维连接蛋白包被培养皿中，采用含多种添加剂的专用培养基维持培养；通过流式细胞术分析表面标志物表达谱，免疫荧光染色验证特异性蛋白表达，并结合功能实验（如分泌功能检测、信号通路分析）综合鉴定细胞类型。

产品名称：大鼠腮腺细胞

英文名称： Rat Parotid Gland Cells

组织来源： 腮腺组织

默认种属 ：SD大鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的大鼠腮腺细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化后差速贴壁，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的大鼠腮腺细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 大鼠腮腺细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 不建议传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大鼠腮腺细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

实验准备：配制腮腺细胞专用完全培养基，准备无菌解剖工具、复合消化液、预冷缓冲液，选取大鼠腮腺腺体组织。

无菌取材：无菌剥离大鼠面部完整腮腺组织，剔除表皮、筋膜、血管及多余结缔组织，PBS漂洗去污。

组织处理：剪碎腮腺腺体组织，轻柔分散腺泡结构，去除杂质组织，保留完整腺体细胞组分。

酶解消化：胰酶与胶原酶复合液37℃消化30min，间断轻柔吹打，解离腮腺单细胞。

纯化离心：血清终止消化，无菌筛网过滤除渣，1200rpm离心5min，收集腮腺细胞沉淀。

接种培养：完全培养基重悬细胞，校准密度后接种，恒温CO₂培养箱静置贴壁培养。

常规养护：48h半量换液清除死细胞，每2–3天换液一次，稳定细胞生长状态，可用于腺体功能实验。

1.取材后需立即将组织置于含10%胎牛血清的Hanks液中运输，4度条件下尽快完成目标脑区的分离与纯化。

2.培养表面需用0.01mg/ml纤连蛋白和0.1mg/ml多聚赖氨酸双重包被，神经元贴壁率和轴突延伸长度均有显著提升。

3.该细胞属于终末分化细胞，体外完全不增殖，全程禁止传代操作，所有功能实验必须在分离后7天内完成，避免神经元自发凋亡。

4.培养基中必须添加NGF(神经生长因子)20ng/ml和B27添加剂，培养24小时后可显著促进神经元存活和轴突延伸。

5.换液操作需极其轻柔，使用预温的培养基沿培养壁缓慢加入，避免液流冲击导致贴壁不牢的神经元脱落。