细胞简介:

大鼠腮腺细胞分离自腮腺组织;腮腺是哺乳类动物口腔中位于下颌角处的最大唾液腺,位于外耳道的前下方,下颌后窝内及下颌支的深面。腮腺也是某些无尾目动物颈部有毒皮肤腺的聚集体;唾液腺有3对,腮腺、舌下腺和颌下腺,其中最大的一对是腮腺。腮腺细胞是高度分化的上皮源性细胞,是一种营养需要复杂、在一般合成培养基中不易生长,体外培养比较困难。目前,DMEM培养液被认为较适于腺细胞的培养。加入一定量的血清更有利于细胞的生长、增殖与分化。另外,接种的细胞密度也是培养成功的关键因素之一,尤其是在腺细胞这种单层细胞培养时,接种的细胞总数量和生长基质表面的细胞密度对整个细胞的生长均有影响。
产品名称 | 大鼠腮腺细胞 | 产品货号 | P-X1620 |
英文名称 | Rat Parotid Gland Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 腮腺组织 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的大鼠腮腺细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化后差速贴壁,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的大鼠腮腺细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:大鼠腮腺细胞
组织来源:腮腺组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶大鼠腮腺细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
原代细胞实验常见问题:

污染防控:实验全程严格无菌操作,超净工作台使用前紫外消毒30分钟,实验用品需高压灭菌;定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒,避免细菌、真菌、支原体污染。
细胞老化与分化:原代细胞传代次数有限,通常传至3-5代后会出现老化,需及时冻存早期代次细胞;培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素,防止细胞自发分化。
实验重复性保障:每次实验使用同一来源、同一代次的细胞,严格控制实验条件(如培养基批次、消化时间、培养时间等),设置足够的重复样本,减少实验误差。
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