组织总RNA小量提取试剂盒

产品简介

组织总RNA小量提取试剂盒采用裂解结合柱膜吸附纯化原理，从动物 / 植物组织样本提取总 RNA，得到高纯度完整总 RNA，产物适用于反转录、qRT‑PCR、RNA 电泳、cDNA 文库构建等下游实验。仅科研体外使用，不用于临床诊断。

试剂盒组分

1. 裂解液：含胍盐裂解组分，裂解组织同时抑制内源 RNase

2. 结合液：调节 RNA 结合柱膜吸附条件

3. 洗涤液 Ⅰ：去除 DNA、蛋白杂质

4. 洗涤液 Ⅱ：去除盐离子杂质（使用前按要求添加无水乙醇）

5. RNase‑Free 洗脱液（无 RNA 酶水）

6. RNA 吸附柱、收集管

储存条件

- 试剂盒整体室温（15‑25℃）避光保存；裂解液避光；

- 洗涤液 Ⅱ 加入无水乙醇后密封室温存放；全部试剂有效期 12 个月；

- 洗脱液‑20℃长期保存。

操作简要步骤

1. 样本处理：组织样本液氮研磨，加入裂解液充分裂解；样本全程避免 RNA 酶污染。

2. 裂解产物离心去除残渣，加入结合液混匀。

3. 混合液转移至 RNA 吸附柱，离心，RNA 结合到柱膜上，弃流出液。

4. 加入洗涤液 Ⅰ 离心洗涤，弃废液。

5. 加入洗涤液 Ⅱ 离心洗涤 2 次，弃废液；空柱离心去除残留乙醇。

6. 将吸附柱转移新无 RNA 酶离心管，向柱膜中央加入 RNase‑Free 洗脱液，室温静置，离心洗脱得到总 RNA。

质量预期

- OD260/280：1.8‑2.1；OD260/230≥1.8

- 完整组织 RNA 琼脂糖电泳可见清晰核糖体 RNA 条带

使用注意事项

1. RNA 极易降解，全程佩戴手套口罩，耗材全部为无 RNase 级别，操作台尽量做 RNase 去除处理。

2. 组织样本尽量新鲜，或‑80℃、液氮冻存，反复冻融组织会造成 RNA 严重降解。

3. 洗涤液 Ⅱ 必须按说明加入无水乙醇，否则 RNA 无法有效纯化。

4. 乙醇残留会抑制后续反转录、qPCR，务必空柱充分离心除乙醇。

5. 洗脱体积可以按需调整；想要高浓度 RNA，可减少洗脱液体积。

6. 提取得到 RNA 建议‑80℃分装保存，避免反复冻融。

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