β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)测试盒

β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)测试盒

产品介绍：

β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。

测定原理：

β-1,3-GA水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

检测原理：

昆布多糖‑DNS 还原糖法：以昆布多糖 (β‑1,3‑葡聚糖) 为底物；酶水解产生还原糖，DNS 沸水显色，540 nm 终点比色。

p‑NP‑β‑D‑葡糖苷底物比色法：人工合成显色底物被水解释放 p‑NP，405 nm 测酶活。

荧光标记昆布多糖淬灭恢复法：荧光‑淬灭双标记 β‑1,3‑葡聚糖，酶切后荧光恢复，荧光强度定量活性。

葡萄糖氧化酶偶联紫外法：水解生成葡萄糖，偶联 GOD‑POD 反应生成有色产物，510 nm 读数。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：

取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）

用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值

以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：

试剂名称(μL) 空白管 测定管

提取液/样本 100 100

试剂一 700 700

试剂二 100 100

混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定