病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒（吸附柱法）

【产品名称】

通用名 ：病毒 DNA/RNA 提取试剂盒（吸附柱法）

Name ：Virus DNA/RNA Extraction Kit（Adsorption column method）

【产品介绍】

本试剂盒可从多种样本中提取 DNA/RNA，包括血清、血浆、全血、组织、拭子、尿液、粪便、疤 液、精液、唾液、环境、饲料等。处理的样本加入裂解液后，混合物移至吸附柱中，然后以通过洗涤、 洗脱即可分离出病毒 DNA/RNA。本试剂盒提取的核酸可以用于荧光 PCR，Northern Blot，cDNA library Construction 等实验。

【试剂组成】

注：洗涤液 1和洗涤液 2 已加无水乙醇，可直接使用

【试剂规格】50T/盒。

【储存运输】

室温保存，有效期 12个月，可室温下运输。

【自备材料和仪器】

灭菌 1.5mL 离心管、各种规格灭菌枪头、离心机（最大转速≥12000rpm）、漩涡混合器等。

【检测方法】

一、样本前处理

1.对全血、血浆、血清、腹水、唾液等非粘稠液体样品的病毒，可以直接取 200μL 样品进行核酸提取；

2.对于动物、植物组织样品，加入适量的生理盐水或 PBS，充分研磨，震荡混匀，12000rpm 离心 5min， 取 200μL 上清进行核酸提取；

3.对于拭子样品中的病毒，在拭子样品中加入适量的生理盐水或 PBS（300-500μL），剧烈涡旋振荡 1min， 取 200μL 样品进行核酸提取；

4.对于粪便中的病毒，在样品中加入适量的生理盐水或 PBS，充分震荡混匀，12000rpm 离心 5min，取 200μL 上清进行核酸提取；

二、试剂准备

试剂盒室温保存，如保存温度过低，应平衡至室温或者温浴，确保各溶液无盐份析出。未使用完的 蛋白酶 K溶液，建议分装放置 4℃保存。

三、样本提取操作

1.在干净的 1.5mL 离心管中加入 200μL 上述处理好的样品（不足 200μL，可以加入 PBS 缓冲液或者生理 盐水补足 200μL) ）和 20μL 蛋白酶 K，然后加入 500μL 裂解液，盖上管盖，振荡 30sec，室温静置 5min； 2.把上述混合物转移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质，以免阻塞 吸附膜），12000rpm离心 1min，弃去套管中液体；

3.向吸附柱中加入 500μI洗涤液 1，12000rpm离心 1min，弃去套管中液体；

4.向吸附柱中加入 500μL 洗涤液 2，12000rpm离心 1min，弃去套管中液体；

5.把吸附柱放回套管中，12000rpm 离心 1min；

6.把吸附柱转移到新的 1.5mL 离心管，加入 50μL 洗脱液，12000rpm 离心 1min，弃去吸附柱，1.5mL 灭 菌离心管中液体即为提取的核酸溶液。可以直接用于逆转录、PCR、荧光定量 PCR等各种下游实验，如 不立即使用，请保存于-80℃冰箱。

【检测结果的解释】

本试剂盒适用于血清、血浆、全血、组织、拭子、尿液、粪便、疱液、精液、唾液、环境、饲料等 样品。

【注检测方法的局限性】

样品量，液体样品建议 200μL，不超过 250μL，固体组织样品需要研磨取上清；灵敏度，使用时需 配以高灵敏度的 PCR检测试剂和仪器。

【性能指标】

假病毒提取产物（DNA 和 RNA）经高灵敏度的核酸检测试剂确定灵敏度为 10² copies/mL，线性范 围为 10³ − 10⁷copies/mL。

【注意事项】

1.试剂各成分除蛋白酶 K外，室温保存，避免形成结晶，如形成结晶，平衡至室温或温浴使结晶溶解；

2.提取的核酸立即用于下游实验，如不立即使用，请保存于-80℃冰箱。