人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法ELISA检测原理，本试剂盒利用抗原竞争性结合抗体的免疫学原理，酶标板微孔包被纯化的人LTD4抗原，加入待测样本、标准品及酶标特异性抗体后，样本中游离LTD4与固相包被LTD4抗原竞争结合酶标抗体；洗板去除未结合反应物后，经TMB底物显色、终止液终止反应，检测体系吸光度，吸光度数值与样本中LTD4浓度呈反比，通过拟合标准曲线可定量测定样本中LTD4的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最小检出 7 pg/mL

检测范围：14 pg/mL ~ 900 pg/mL

反应时间：竞争模式孵育 100min，酶结合物 60min，显色 15~20min

显色系统：单液 TMB 显色体系

检测波长：450nm，参比 630nm

特异性：主要识别 LTD4，与半胱氨酰白三烯家族其他组分低交叉

重复性：同板 CV＜9.5%，批次间 CV＜12.5%

注意事项：全程避光操作；标准品稀释液不可混用其他试剂盒试剂
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒全部组分室温放置 30min，倍比稀释标准品，待测上清样本预处理去除沉淀。

标准品孔、样本孔各加 100μL 液体，空白孔补稀释液，加入酶偶联抗体 50μL 密封封板。

湿盒内 37℃孵育 95min。

洗涤液洗板 6 轮，每轮浸泡 30s，倒扣拍干酶标板。

加入 TMB 显色工作液 100μL，遮光显色 14min。

终止液 50μL 混匀终止酶促显色。

酶标仪 450nm 检测吸光度，绘制标准曲线计算 LTD4 含量。