试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
商品属性:
产品名称:LT-D4检测试剂盒
英文名称:Guinea pig leukotriene D4, LT-D4 Elisa Kit
型号:EY-01G2838
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
人心脏成纤维细胞( HCF) ( 5×105 ) GC-1, 鼠精原细胞 Mouse二苯并-21-冠7-(>96.0%(GC))质量规格:>96.0%(GC)Dibenzo-21-crown 7-Ether
小鼠成纤维细胞;φ24'-甲酰苯并-15-冠-5-(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether
TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-甲酰苯并-18-冠-6-(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether
SHG-44人胶质瘤细胞 Human glioma cell line SHG-44 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,7,13,21,24-六氧杂-1,10-二氮杂双环[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T))质量规格:>98.0%(GC)(T)4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane
IMR-32细胞,人神经母细胞瘤细胞 黄杆菌属 人脑血管平滑肌细胞RNAHBCSMC miRNA5 μg二-N-去乙基胺酮质量规格:美国进口Di-N-desethyl Amiodarone
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) X-SA琼脂培养基shēng huà shì jì容量:RT1把/包
MEG-01 人成巨核细胞白血病细胞偶氮录膦mN;2-(4-录-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-肖基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo MN 77320-04-0
MSTO-211H人肺癌细胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS (50%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ... 10ML 通用试剂
MIF Protein Human 重组人 MIF / GLIF 蛋白 (His 标签)L-天门冬酸钾shēng huà shì jì容量:RT25克
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] 人支气管成纤维细胞完全培养基 100mL(二硫代苏糖醇)
LT-D4检测试剂盒人胎盘绒毛膜细胞完全培养基 100mLN-氧基奥氮平Olanzapine N-Oxide质量规格:美国进口
MA-891细胞,小鼠癌高转移细胞 L929(成纤维细胞) 人葡萄膜色素细胞;UM氨曲南Aztreonam质量规格:> 95%,BR
CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)氨曲南(标准品)Aztreonam质量规格:HPLC>95%,标准品
RH-35(大鼠肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 巴卡丁 IIIBaccatin III质量规格:度> 98%,BR,可用于细胞培养
人肺转化细胞;AE1201巴卡丁 III(标准品)Baccatin III质量规格:HPLC>98%,标准品