大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将纯化的大鼠iNOS特异性抗体固定于酶标板微孔，加入标准品及大鼠待测样本后，样本中的诱导型一氧化氮合成酶抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离成分，加入酶标记iNOS检测抗体形成夹心复合物，经底物显色、终止反应后，吸光度数值与样本中iNOS浓度成正比，通过标准曲线拟合完成定量分析。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.1ng/mL

检测范围：0.25ng/mL - 30ng/mL

反应时间：全程130分钟（样本孵育70min，酶标孵育30min，显色30min）

保存条件：2-8℃避光冷藏，标准品-20℃分装冻存

有效期：未开封储存有效期10个月

特异性：特异性识别大鼠iNOS，与eNOS、nNOS亚型无交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤5%，板间变异系数CV≤8%

注意事项：样本需低温处理，防止酶失活；实验避免一氧化氮气体干扰；孵育环境恒温恒湿
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，配制洗涤缓冲液，逐级稀释 iNOS 标准品，标记酶标板检测微孔组别。

标准孔加入梯度诱导型一氧化氮合成酶标准品 50μL，待测孔加入 50μL 大鼠组织裂解液，空白孔无液体添加。

全部检测孔加入一步法酶偶联抗体工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 58min。

揭膜弃液，洗涤液加满微孔浸泡 30s 甩干，洗板 4 次，拍干残留洗涤液。

每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 17min。

滴加终止液 50μL 终止显色反应，轻微震荡板面混匀。

酶标仪 450nm 测定吸光度，计算样本 iNOS 表达水平。