大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒

本试剂盒运用经典双抗体夹心ELISA技术，将大鼠OPG特异性单克隆抗体包被于酶标板，待测大鼠样本中的OPG抗原与包被抗体结合，再加入酶标记多克隆抗体形成稳定免疫夹心结构，底物显色后测定吸光度，数值与样本OPG含量成正比，结合标准曲线即可完成样本中骨保护素的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤15pg/mL

检测范围：30pg/mL - 1200pg/mL

反应时间：总反应时长120分钟（样本温育60分钟、酶温育30分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光冷藏，浓缩试剂使用前稀释，剩余试剂密封保存

有效期：未开封有效期6个月，开封后2个月内用完

显色系统：TMB底物显色体系，显色均匀、误差小

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠OPG蛋白，无RANKL、骨钙素交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：骨组织、血清样本均可检测；样本离心去除杂质，避免悬浮颗粒干扰读数
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒组分室温平衡 33min，溶解 OPG 冻干标准品进行梯度稀释，划分酶标板孔型并编号。

一步直接加样：标准孔加梯度 OPG 标准液 100μL，待测孔加大鼠骨组织上清样本 100μL，空白孔加稀释液。

封板膜封口，37℃恒温孵育 68min，实现 OPG 抗原与固相捕获抗体结合。

倒掉孔内液体，洗涤液浸泡每孔 36s 后弃除废液，连续洗板 5 次，板底充分拍干。

所有检测孔加入 HRP 标记检测抗体 100μL，避光封板，37℃孵育 33min。

依次添加显色 A、B 液各 50μL，轻震混匀，避光 37℃显色 19min。

加入终止液终止反应，450nm 酶标仪读数，拟合标准曲线计算 OPG 浓度。