人骨保护素(OPG)(OPG)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗OPG单抗（如小鼠IgG1），靶向OPG的TNF受体结构域（检测范围0.1–30 ng/mL）。

信号放大：HRP标记的二抗与TMB显色联用（灵敏度达0.05 ng/mL），可检测游离OPG及OPG-RANKL复合物。

抗干扰设计：含RANKL阻断肽（1 μg/mL），降低与RANKL的交叉结合（交叉反应率＜0.1%）。

 动态范围优化

覆盖生理水平（健康人血清0.5–4 ng/mL）至病理浓度（如多发性骨髓瘤患者＞15 ng/mL）。

二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗OPG（氨基酸残基22-401）抗体固定化（批间差＜7%）

标准品  重组人OPG（0、0.2、1、5、10、20、30 ng/mL，含0.1% HSA稳定剂）

适用样本  血清（首选）、血浆（EDTA抗凝）、骨组织匀浆（需含10 mM EDTA裂解液）

特殊添加剂  含防腐剂，2–8℃保存有效期24个月

三、临床应用与科研价值

骨代谢疾病诊断

骨质疏松：OPG/RANKL比值＜0.2提示骨吸收活跃（联合β-CTX检测可提高准确性）。

Paget骨病：血清OPG水平与骨病变范围正相关（＞10 ng/mL需干预）。

肿瘤骨转移监测

乳腺癌、前列腺癌骨转移患者OPG水平异常升高（反映代偿性骨保护反应）。

心血管研究

动脉钙化患者血管壁OPG表达上调，与心血管事件风险相关。

四、操作规范与质控要点

样本处理

骨组织样本需液氮速冻，裂解缓冲液含1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂。

避免使用肝素抗凝血浆（可能干扰OPG-RANKL相互作用）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜8%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可区分游离OPG与复合物形式  无法检测OPG基因多态性（如Val281Ala）

特异性  与RANK/TRAIL交叉反应＜0.1%  溶血样本需超速离心（Hb干扰显色）

通量  适配自动化平台 组织样本需优化均质化方法