总胆固醇(TC)含量测试盒

总胆固醇(TC)含量测试盒

产品介绍：

TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。

测定原理：

利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC)和游离脂肪酸（FFA)，从而把胆固醇酯

转化为 FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-胆甾烯酮和 H2O2；最后利用

过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm 有特征吸

收峰，其颜色深浅与 TC 含量成正比。

自备仪器和用品：

水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板。

检测原理：

酶促水解：胆固醇酯在胆固醇酯酶作用下水解为游离胆固醇和脂肪酸

胆固醇氧化：游离胆固醇在胆固醇氧化酶作用下氧化生成胆甾-4-烯-3-酮和过氧化氢

显色反应：过氧化氢在过氧化物酶作用下与4-氨基安替比林和酚类物质反应生成红色醌类化合物

检测波长：在500-550nm波长下测定吸光度，吸光度与总胆固醇含量正相关
公司正在出售的产品：

操作步骤：

比色法/COD-PAP法/分光光度法操作仪器预热：分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到500~520nm，蒸馏水调零试剂配制：

试剂二：临用前加入10mL蒸馏水充分溶解备用

试剂三：临用前加入20mL蒸馏水充分溶解备用样本测定：

试剂名称(μL) 空白管 测定管

蒸馏水/样本 100 100

试剂一 700 700

试剂二 100 100

试剂三 100 100

混匀后37℃水浴15min，记录500~520nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制：将FC标准品稀释成0、0.031、0.063、0.125、0.25、0.5、1μmol/L系列浓度，同样处理，测定500~520nm处的吸光值，绘制标准曲线

ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：

从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃

设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度