多功能氧化酶(MFO)测试盒

多功能氧化酶(MFO)测试盒

产品介绍：

多功能氧化酶又称混合功能氧化酶，可产生降解反应，可使原化学物质变为低毒的或无毒的物质从体内排出；还可产生激活反应，可使原化学物质转化为具有亲电子性质，导致毒性增强，成为致突变物或终致癌物。近年来对混合功能氧化酶系与外源性化学物质相互作用的深入研究，对于从分子生物学水平上进一步了解外源性化学物质的毒作用具有重要意义。

测定原理：

MFO催化对硝基苯甲醚产生对硝基苯酚，在405nm下有特征吸光值。

自备用品：

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

检测原理：

混合功能氧化反应：MFO催化底物发生氧化、还原、水解等多种反应，产生荧光产物

荧光检测：使用荧光分光光度计测定产物的荧光强度，激发波长为340nm，发射波长为530nm

活性定义：每分钟催化产生1nmol荧光产物所需的酶量为一个酶活性单位

诱导剂验证：可使用苯巴比妥等诱导剂处理样品，验证MFO活性的变化
公司正在出售的产品：

操作步骤：

标准曲线绘制：

取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。

每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

样本检测：

取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。

微量酶标仪法操作步骤

加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。

反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。

终止：每孔加入50μL终止液。

读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。