5637人膀胱癌细胞专用培养基 新品

商品属性：

产品名称：5637人膀胱癌细胞专用培养基

英文名称：5637 Cell Complete Medium

产品简介 5637细胞专用培养基由普诺赛技术团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持5637细胞最佳的生长状态。本产品中已包含5637[Cat. No.:CL-0002]细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分

，可直接用于5637[Cat. No.:CL-0002]细胞的体外培养。本产品仅用于科研或进一步研究使用，不用于诊断和

治疗。

产品形态 ：液体

细菌检测 ：阴性

真菌检测 ：阴性

支原体检测： 阴性

产品浓度 ：1×

产品规格 ：125mL×4

pH 7.4-7.8

培养基成分: RPMI-1640 [PM150110]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120]

细胞生长实验: 细胞生长良好，形态正常

内毒素含量 :< 3 EU/mL

储存条件: 2-8℃，避光储存

运输条件 :冰袋运输

有效期: 6个月核心配方‌：主流供应商均确认，该细胞最适合的基础培养基为‌RPMI-1640‌，需添加10%胎牛血清和1%双抗维持细胞生长，推荐直接使用对应品牌的配套专用完全培养基，以获得最佳培养效果。

‌培养环境‌：37℃恒温培养箱，通入5%CO₂，保持饱和湿度，气相环境为95%空气+5%CO₂。

‌换液频率‌：常规每‌2-3天更换一次新鲜培养基‌，每周换液2-3次即可。

实验步骤：

一、冻存细胞复苏操作

提前将水浴锅预热至‌37℃‌，打开超净工作台紫外消毒，专用培养基提前放回室温复温。

从液氮中取出细胞冻存管，迅速投入37℃水浴，持续轻微摇动，1-1.5分钟内快速解冻至仅剩小块冰即可。

取出冻存管喷75%酒精消毒，移入超净台，将细胞悬液转移至含‌10ml 5637专用培养基‌的15ml离心管中，1000转离心5分钟。

弃上清，加入1ml新鲜专用培养基重悬细胞，转移至含10ml培养基的10cm培养皿，轻轻摇动使细胞均匀分布，做好标记后放入37℃、5%CO₂培养箱培养。

细胞贴壁后更换新鲜专用培养基，后续每2-3天更换一次培养基。

二、细胞传代操作（细胞覆盖率达到80%-90%时进行）

从培养箱取出培养瓶，吸净原有旧培养基。

加入3-4ml常温PBS轻轻润洗细胞10-20秒，吸走PBS去除残留血清（避免影响胰酶消化效果）。

T25培养瓶加入约‌1ml胰酶‌，轻轻晃动使胰酶铺满瓶底，放入37℃培养箱消化，因该细胞贴壁偏紧，需延长消化时间，观察到细胞间隙变大、大部分细胞变圆回缩后，立即加入2-3ml‌5637专用培养基‌终止消化。

用移液枪轻柔吹打瓶壁使细胞全部脱落，将细胞悬液转移至15ml离心管，900-1000转离心3-5分钟。

弃上清，加入1-2ml新鲜专用培养基重悬细胞，按照‌1:2-1:4‌传代比例分到新培养瓶中，补足专用培养基后放回培养箱静置培养。

三、细胞冻存操作（细胞状态良好时操作）

按上述传代步骤消化离心获得细胞沉淀，配制冻存液：新手推荐‌92%FBS+8%DMSO‌，常规也可使用70%专用培养基+20%FBS+10%DMSO，DMSO需缓慢滴加边滴边摇。

用配制好的冻存液轻轻重悬细胞，调整细胞密度至200-300万/ml，分装到标记好的冻存管中，每管1ml。

梯度降温：放入程序冻存盒后直接入-80℃冰箱过夜；无程序冻存盒可按4℃静置30min→-20℃放置30min→-80℃冰箱过夜，第二天转移至液氮罐长期保存。

冻存后建议复苏一管检测细胞活性，确认无异常后记录冻存位置即可。