转基因植物NPTⅡ基因PCR检测试剂盒

‌产品名称：转基因植物NPTⅡ基因PCR检测试剂盒

英文名称：PCR Detection Kit for NPTⅡ Gene of Genetically Modified Plants

货号：YS-P015366

分类：PCR检测试剂盒

规格‌：50T/盒

检测原理：
靶向卡那霉素抗性标记 NPTⅡ 基因，该序列不存在于天然野生植物基因组

多重缓冲组分适配谷物、果蔬各类植物样本核酸扩增，抗杂质干扰

扩增产物阳性条带证明植株转化载体携带 NPTⅡ 筛选标记基因
实验流程：
样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

公司正在出售的产品：

注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染

无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服

试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心

避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作

防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台