转基因植物Bar基因检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

商品属性：

Bar基因的作用：Bar基因编码一种名为膦丝菌素乙酰转移酶 的蛋白质。这种酶能够使植物对草铵膦 类除草剂（如Basta、Liberty等）产生抗性。当喷洒草铵膦时，含有Bar基因的植物能够存活，而不含该基因的杂草则会被杀死。

应用作物：Bar基因被广泛导入多种转基因作物中，以实现除草剂抗性，例如：

转基因大豆、玉米、棉花、油菜

一些转基因水稻和小麦（在研发或试验阶段）

因此，检测Bar基因就等于检测了这些相关的转基因品系。

2. 核心技术原理：荧光PCR法：

荧光PCR法，也称为实时荧光定量PCR，是在传统PCR基础上加入了荧光染料或探针，从而能够实时监测扩增产物的积累。

工作流程如下：

DNA提取：从待测植物样品中提取纯化基因组DNA。

PCR反应体系配制：将提取的DNA、检测试剂盒中的引物、探针、PCR缓冲液、酶等混合。

引物：一对特异性短核苷酸序列，设计用于唯一性地识别并结合Bar基因的特定片段。

荧光探针：一条标记了报告荧光基团 和淬灭荧光基团 的特异性探针。当探针完整时，报告基团的荧光被淬灭基团抑制。当PCR扩增发生时，DNA聚合酶会水解探针，使报告基团游离并发出荧光。

实时荧光PCR扩增：

变性：高温使DNA双链解开。

退火：降温使引物和探针特异性地结合到目标Bar基因序列上。

延伸：中温下，DNA聚合酶沿着模板合成新的DNA链，并水解探针，释放荧光信号。

每完成一个循环，目标基因片段的数量就几乎翻倍，同时释放的荧光信号也相应增强。

信号检测与结果判读：

仪器实时监测每个反应管中的荧光强度。

当荧光信号超过预先设定的阈值 时，所经历的PCR循环数称为Ct值。

结果判读：

阳性：样品中含有Bar基因。PCR能够有效扩增，荧光信号会快速增长，并在一定循环数内（通常Ct值 < 35-40）超过阈值。

阴性：样品中不含有Bar基因。无特异性扩增，荧光信号始终不增长或增长极其缓慢，无法达到阈值（或无Ct值）。

3. 试剂盒的典型组成：

一个完整的试剂盒通常包含：

Bar基因检测液：含有针对Bar基因的特异性引物和探针的预混液。

阳性对照：含有已知浓度的Bar基因片段的质粒或DNA，用于验证实验是否成功。

阴性对照：不含Bar基因的植物DNA或纯水，用于排除污染和假阳性。

PCR反应缓冲液和DNA聚合酶。

使用说明书。

4. 主要特点与优势：

高灵敏度：可以检测出极微量的转基因成分，理论上即使只有一个拷贝的目标基因也能被检测到。

高特异性：引物和探针经过精心设计，只与Bar基因反应，避免了与其他基因的交叉反应。

快速高效：整个PCR过程通常在1.5-2小时内完成，适合高通量筛查。

定量能力：通过与已知浓度的标准品对比，该方法不仅可以进行定性检测（有/无），还能进行定量分析，计算出样品中转基因成分的百分含量，这对于许多国家的转基因标识法规至关重要。

闭管操作：PCR反应和检测在密闭的管中进行，大大降低了扩增产物污染的风险。

5. 主要应用领域：

食品安全与标识管理：检测食品、饲料及其原料中是否含有未经批准的转基因成分，或确保符合转基因标识阈值（如欧盟的0.9%）。

进出口检验检疫：在口岸对进口农产品进行强制性转基因筛查，确保符合本国法规。

种子纯度与真实性认证：确保非转基因种子不被污染，或验证转基因种子的真实性。

科学研究：在植物分子生物学和遗传改良研究中，用于鉴定转基因植株。

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注意事项：

防止污染：实验室必须严格分区（试剂准备区、样品处理区、扩增区），避免PCR产物的气溶胶污染导致假阳性。

内参照基因：一个完整的检测还必须包括一个植物内参照基因（如玉米IVR基因、大豆Lectin基因）的检测。这用于确认提取的DNA质量和数量是否合格，避免因DNA降解或提取失败而导致的假阴性。

仪器要求：需要专业的实时荧光定量PCR仪。

人员要求：操作人员需要经过专业培训，具备分子生物学实验技能。