玉米MON/MS PCR检测试剂盒

本试剂盒整合玉米MON转基因基因与MS特异性基因双检测靶点，采用复合PCR扩增技术，可同步检测玉米样本中MON、MS基因的存在情况。试剂盒优化双引物配比，扩增体系稳定、特异性高，双靶点检测结果互不影响，可实现转基因品系精准鉴定与基因复合筛查，适用于玉米多基因检测、转基因种子纯度检测、农产品深加工品成分核验。

基础原理：

裂解玉米组织提取 DNA，内源 MS 基因作为样本提取质控，MON 引物检测转基因。

双靶标同步扩增，MS 条带证明核酸提取有效，MON 条带判定转基因阳性。

仅出现 MS 条带为阴性，双条带共存为 MON 转基因玉米阳性样本。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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