间日疟PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒为疟原虫分子检测专用产品，通过PCR扩增技术特异性检测间日疟原虫核酸，可对人体血液样本中的病原进行精准筛查。相较于传统显微镜镜检，灵敏度更高，可检出低原虫血症的隐匿性感染，特异性强，可区分间日疟与恶性疟等其他疟原虫，适用于临床疟疾分型诊断、疫区疟疾筛查、出入境人员检疫及疟疾防控监测。

基础原理：

引物靶向间日疟原虫 18S rRNA 基因特异可变区，可区分间日疟与其他疟原虫种类。

提取患者外周血内疟原虫基因组 DNA，PCR 扩增放大低虫血症样本核酸信号。

借助阳性虫体 DNA 对照，辅助疟疾精准分型，指导临床抗疟用药方案。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染

无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服

试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心

避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作

防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台

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