田鼠分枝杆菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒靶向田鼠分枝杆菌保守基因序列设计PCR扩增体系，可精准检测啮齿动物样本中的田鼠分枝杆菌核酸。该菌是啮齿动物结核病主要病原，可跨界感染其他动物，试剂盒检测精准、特异性强，适用于野生动物疫病监测、养殖环境病原溯源、人畜共患病防控。

基础原理：

啮齿动物脏器病灶提取分枝杆菌 DNA，引物靶向田鼠分枝杆菌特有毒力片段扩增。

终点 PCR 电泳鉴定目标核酸条带。

健康田鼠组织阴性对照，排除宿主基因组干扰。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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