大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒#科研专用#

IL27简单介绍：白细胞介素27（IL-27）是由EBI3和p28亚单位通过二硫键构成的异源二聚体。IL-27可以促进Th1和Tr1分化, 抑制Th2、Th17及Treg应答, 在免疫调节方面具有重要作用。IL-27 属于IL-12家族成员,主要由抗原提呈细胞,包括树突状细胞、巨噬细胞等在微生物或其他免疫刺激物刺激下产生,其受体广泛分布于多种免疫细胞。IL-27信号通过细胞上的异源二聚体受体IL-27R传导至胞内。IL-27R由WSX-1 和gp130亚基构成。WSX-1和gp130可以在包括T细胞、NK细胞、B细胞、髓系细胞等多种细胞上表达。

ELISA实验前，样本前处理

在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后 当天就进行

检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

    液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1. 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2. 血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3. 尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

5. 培养细胞

    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6. 组织标本

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。