大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 新品

大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒

产品简介:

一、核心检测信息

检测目标：大鼠IL-27，由p28（IL-27A）和EBI3（IL-27B）组成的异源二聚体细胞因子，通过结合IL-27R调控Th1/Treg分化

方法学：双抗体夹心ELISA（符合ISO 13485:2025标准），特异性识别完整IL-27复合物

适用样本：

血清/血浆（推荐EDTA抗凝，避免肝素干扰）

树突细胞培养上清（刺激后24h采样）

脾脏/淋巴结组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）

二、关键性能参数

参数  技术规格  生物学意义

检测范围  15-3000 pg/mL  覆盖静息至炎症状态水平

灵敏度  4.5 pg/mL（LoD=1.8 pg/mL）  可检测单核细胞早期分泌量

特异性  不结合p28或EBI3单体  精准反映功能性IL-27活性

抗干扰性  耐受10%胎牛血清  适合细胞培养样本

三、实验操作关键点

样本处理

避免反复冻融（推荐分装保存于-80℃）

组织样本建议采用低温研磨（液氮预冷）

检测优化

高浓度样本需用稀释液（含1% BSA）预稀释

建议设置TLR激动剂刺激阳性对照（如LPS处理的BMDCs）

数据分析

推荐五参数logistic曲线拟合（低浓度区更精确）

建议同步检测IFN-γ/IL-10（下游效应因子）

四、前沿应用方向

自身免疫病

多发性硬化模型中IL-27对Th17/Treg平衡的调控

评估IL-27基因治疗炎症性肠病（IBD）的疗效

感染免疫

结核分枝杆菌感染中IL-27的免疫逃逸机制

肿瘤免疫

检查点抑制剂治疗后的IL-27动态变化

五、特别注意事项

分泌动态：体内半衰期约40分钟（需控制采样时间窗）

替代技术：ELISPOT可检测IL-27分泌细胞频率

行业新规：2025年WHO将IL-27纳入慢性炎症分级标准

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。