大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板固定纯化的大鼠TSH特异性捕获抗体，加入标准品与待测大鼠样本后，样本中的TSH抗原被固相抗体特异性捕获，洗涤干净后加入酶标记的TSH检测抗体，形成稳定的三元夹心免疫复合物，底物显色后根据吸光度变化，对照标准曲线精准检测样本中TSH的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒

英文名称：TSH ELISA Kit
货号：Y-E1609

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出限0.08mIU/L，可精准检测大鼠微量甲状腺调节激素水平。

检测范围：0.2mIU/L - 15mIU/L，覆盖大鼠正常及甲状腺功能异常模型TSH浓度。

反应时间：总时长100分钟，样本孵育40min、酶孵育30min、显色25min、终止读数5min。

保存条件：2 - 8℃避光保存，底物液、终止液分开存放，避免混合失效。

有效期：原装未开封有效期6个月，开封后2周内使用。

显色系统：高灵敏甲状腺激素显色系统，背景值极低。

检测波长：450nm标准检测波长。

标准曲线绘制：五梯度标准品拟合，四参数方程，R²≥0.994。

特异性：特异性识别大鼠TSH，与TRH、T3、T4无交叉反应。

重复性：板内CV≤3.5%，板间CV≤5.5%，数据可靠。

注意事项：样本避免反复冻融，防止激素分子降解；洗板充分，杜绝非特异性吸附；显色终止后立即读数，防止颜色衰减。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

TSH 冻干标准品梯度稀释，试剂盒室温平衡 27min，标记酶标板孔类型；

标准孔加 50μL 梯度标准品，样本孔加入大鼠血清 50μL，空白孔填充稀释液；

快速加入 100μL HRP 标记抗 TSH 抗体，密封酶标板；

37℃恒温孵育 59min，一步共孵育免疫结合；

洗板液浸泡微孔 35s，拍干残留液体，洗板 5 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反应 16min；

终止液终止显色，450nm 检测 OD 值，计算 TSH 含量。
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