大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 体系，固相载体预包被抗大鼠 CRP 捕获抗体，样本急性期反应蛋白 CRP 结合固相抗体，酶标检测抗体形成夹心复合物，洗涤显色后 OD 值对应 CRP 浓度，标准曲线定量炎症标志物。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.2mg/L，适配大鼠CRP低浓度基础水平检测

检测范围：0.5mg/L - 200mg/L，覆盖大鼠生理及炎症病理状态CRP浓度区间

反应时间：总反应时长120分钟，样本孵育60分钟，酶标孵育30分钟，显色15分钟，终止5分钟

保存条件：2 - 8℃避光冷藏保存，严禁冷冻，洗涤液室温保存

有效期：原装未拆封有效期6个月，规范储存活性稳定

显色系统：优化型TMB显色体系，显色响应快，梯度清晰

检测波长：450nm标准检测波长，630nm背景校正

标准曲线绘制：6点梯度浓度，四参数曲线拟合，R²≥0.995

特异性：特异性识别大鼠CRP，与大鼠其他急性期蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，符合科研检测标准

注意事项：血清样本需分离彻底，无溶血、脂血；炎症模型样本浓度过高需梯度稀释后检测；孵育温度恒定37℃，避免温度偏差
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温静置 30min，洗涤液 1:20 稀释，大鼠血清样本室温解冻。

标准品稀释：CRP 标准品溶解梯度稀释 6 梯度，空白对照孔。

加样孵育：每孔 50μL 标准品 / 样本，酶结合物 50μL，37℃避光密封孵育 65min。

洗板操作：洗涤液浸泡 35s，充分拍干，洗板 6 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 17min。

终止读数：终止液混匀，10min 内 450nm 读数。

数据计算：标准曲线计算 CRP 浓度，评价全身炎症反应程度。