人C反应蛋白(CRP)elisa试剂盒

1. 检测原理

双抗体夹心ELISA（最常用）：

捕获抗体：预包被在微孔板上，特异性结合样本中的CRP。

检测抗体：酶标抗体（如HRP标记）与CRP结合，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物，HRP催化显色（蓝色→黄色），OD值与CRP浓度成正比。

高敏CRP（hs-CRP）检测：优化灵敏度（检测范围0.1-10 mg/L），适用于心血管风险评估。

2. 主要组分

 组分  说明

预包被微孔板  96孔或48孔，包被抗CRP抗体

CRP标准品  0-50 μg/mL（常规CRP）或0.1-10 mg/L（hs-CRP）

酶标抗体  HRP/ALP标记的抗CRP抗体

显色底物（TMB）  催化后显蓝色，终止后变黄色

终止液（H?SO?）  终止反应，稳定颜色

洗涤缓冲液（PBS-T）  含吐温-20，去除未结合物质

样本稀释液  减少基质效应（如高脂血干扰）

3. 适用样本类型

血清（推荐无溶血、无脂血样本）

血浆（EDTA/肝素抗凝，避免反复冻融）

其他体液（如脑脊液、关节液，需验证）

样本处理建议：

采集后离心（3000 rpm, 10 min）去除颗粒物。

短期可4℃保存（≤3天），长期需-20℃/-80℃冻存。

5. 数据分析

标准曲线：以标准品浓度（X轴）对OD值（Y轴）拟合（四参数/对数曲线）。

计算样本浓度：根据曲线方程计算，注意稀释倍数（如1:100稀释样本需×100）。

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4. 操作步骤（简版）

加样：标准品/样本加入微孔板（建议复孔）。

孵育（37℃, 30-60 min）：CRP与捕获抗体结合。

洗涤：洗去未结合蛋白。

加酶标抗体（37℃, 30 min）。

洗涤：去除游离酶标抗体。

显色（TMB, 避光15 min）。

终止（加H?SO?），测450 nm OD值（参考630 nm）。