人视网膜色素上皮细胞 新品

商品属性

细胞简介

人视网膜色素上皮细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力最强。视网膜色素上皮(RPE)位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道；主要是由单层色素上皮细胞所构成，排列十分规则。视网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形，细胞分为三部分，即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力，细胞死亡后不被替换，而是邻近的细胞向侧面滑动，以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。
产品信息

产品名称 人视网膜色素上皮细胞

组织来源 视网膜组织

种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人视网膜色素上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人视网膜色素上皮细胞经S-100免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：Accutase消化液：或0.25%胰蛋白酶人视网膜色素上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

1. 细胞组成：视网膜外层单层色素上皮屏障细胞

2. 形态结构：六角形铺路石排列，胞含黑色素颗粒

3. 分子标记：RPE65、Bestrophin、CRALBP

4. 功能特性：感光细胞代谢支持、光吸收、血 - 视网膜外屏障

核心功能

吞噬降解感光细胞外节，维持感光细胞正常功能

构成血 - 视网膜屏障，调控营养输送与废物代谢

吸收散射光线、抗氧化，保护视网膜感光组织

参与视网膜退变、黄斑病变、眼底疾病病理进程
原代细胞传代操作指南

传代时机判断

当细胞融合度达到70%-80%时进行传代，此时细胞活力最佳，避免过度融合导致接触抑制

若细胞生长缓慢或形态变差，可提前传代调整密度

具体操作步骤

预处理：提前预热培养基、胰蛋白酶和PBS，准备好无菌离心管、移液管等耗材

消化细胞：吸弃旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞表面1-2次，去除残留血清；加入适量胰蛋白酶（覆盖细胞表面即可），37℃孵育1-3分钟，期间在显微镜下观察，待细胞边缘收缩、变圆且开始脱落时终止消化

终止消化与收集：加入等量含血清的培养基中和胰蛋白酶，用移液管轻轻吹打培养瓶壁，使细胞完全脱落形成细胞悬液；将细胞悬液转移至离心管，以1000rpm离心5分钟

重悬与接种：弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞，按1:2-1:3的比例接种至新的培养瓶，补充培养基后轻轻摇匀，放入培养箱继续培养

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