兔胚胎成纤维细胞 新品

商品属性

细胞简介

兔胚胎成纤维细胞分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
产品信息

产品名称 兔胚胎成纤维细胞

组织来源 胚胎组织

种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的兔胚胎成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔胚胎成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶兔胚胎成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：兔全胚胎结缔组织来源原始成纤维细胞，胚胎广谱间质细胞

形态结构：梭形、大小均一，增殖旺盛，贴壁快速

分子标记：Vimentin、Collagen Ⅰ、FSP-1

功能特性：胚胎组织发育支撑；基质合成、高增殖特性，广泛用于细胞培养滋养、基础科研

核心功能

1. 胚胎发育关键间质细胞，支撑多组织器官形态建成

2. 广谱分泌生长因子，调控胚胎细胞增殖与分化进程

3. 增殖活性高、分裂稳定，常用作细胞培养滋养细胞

4. 胚胎发育毒理、干细胞培养基质、基础细胞实验
实验室培养与操作指南

原代细胞分离方法

采用胶原酶-胰酶联合消化法：

将组织剪碎至1mm³大小

加入含0.1%Ⅰ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振荡消化60-90分钟

200目滤网过滤，去除未消化组织

1200rpm离心5分钟，弃上清液收集细胞沉淀

用PBS重悬细胞，接种至培养瓶

培养条件

培养基：专用细胞培养基（含10%胎牛血清、1%双抗、成脂诱导因子）

培养环境：37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱

包被处理：培养瓶需经多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被，增强细胞贴壁性

换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基

传代操作步骤

吸弃旧培养基，用PBS轻洗细胞层2次

加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆

加入等体积培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落

1000rpm离心5分钟，弃上清后用培养基重悬细胞

按1:2或1:3比例接种至新培养瓶

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