兔外周血树突状细胞 (成熟DC细胞)

兔外周血树突状细胞（成熟DC细胞）是由兔外周血中的前体细胞分化而来的成熟抗原呈递细胞。它表面表达丰富的共刺激分子和抗原呈递分子，能够高效地摄取、加工和呈递抗原给初始T细胞，激活特异性免疫应答，是连接固有免疫和适应性免疫的重要桥梁。成熟DC细胞在兔机体抵御病原体感染、抗肿瘤免疫以及免疫耐受调节中发挥关键作用，可通过体外培养外周血单个核细胞并加入细胞因子诱导分化获得。
产品名称 兔外周血树突状细胞 (成熟DC细胞)

英文名称：Rabbit Peripheral Blood Maturation Dendritic Cells

货号：YS-01X8445

组织来源 外周血

种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的兔外周血成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔外周血树突状细胞(成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细胞形态：等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形，树突状

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶兔外周血树突状细胞 (成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

兔外周血DC细胞分离自外周血，由外周血单核细胞诱导而成的；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未完全诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起（高倍镜或者电镜下可观察到 ），伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。

细胞组成：外周血分化成熟的专职抗原提呈细胞

形态结构：胞体大，表面大量树突状突起，形态伸展不规则

分子标记：CD80、CD86、MHC-II、CD11c

功能特性：最强抗原提呈能力，激活初始 T 细胞，启动特异性免疫应答

高效抗原呈递，激活初始 T 细胞免疫应答

高表达共刺激分子，启动强特异性免疫

调控免疫分化方向，决定免疫应答强度

参与炎症免疫、自身免疫及免疫监视

1.取材：新鲜组织（动物 / 临床），预冷 PBS 冲洗，去除血污、脂肪、包膜。

2.修剪：剪成1 mm³小块，PBS 洗 3–5 次至澄清。

3.消化：

加 3–5 倍体积0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 轻摇。

纤维组织换胶原酶，37℃消化 30–60 min。

4.终止：加等体积含血清培养基中和胰酶。

5.过滤：100 μm 筛过滤，弃未消化块。

6.离心：300–400 g × 5 min，弃上清；PBS 重悬洗涤 1 次。

7.接种：完全培养基重悬，计数；按1×10⁵–5×10⁵ cells/cm²接种。

8.培养：37℃、5% CO₂；24 h 内不动，48–72 h 首次换液。