人巩膜成纤维细胞 新品

人巩膜成纤维细胞是构成巩膜的主要细胞，位于巩膜基质层，参与巩膜的结构维持和修复。细胞呈成纤维细胞样形态，表达Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA标志物，可分泌细胞外基质维持巩膜的坚韧度。其功能异常与近视、巩膜葡萄肿、巩膜炎等疾病相关，常用于研究巩膜生理病理、近视发生机制及眼科疾病药物研发。
产品名称 人巩膜成纤维细胞

英文名称：Human Scleral Fibroblast Cells

货号：YS-01X7700

组织来源 巩膜组织

种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人巩膜成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人巩膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶人巩膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

人巩膜成纤维细胞分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近最厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚(巩膜厚度：后极部1mm，赤道部0.4～0.5mm，直肌附着处0.3mm)。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

细胞组成：眼球巩膜结缔组织成纤维细胞，眼壁结构维持细胞

形态结构：细长梭形、纤维样，排列平行束状，贴壁稳定，胞核细长

分子标记：Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅴ、FSP-1、Tenascin

功能特性：合成胶原与细胞外基质，维持巩膜厚度与韧性，参与近视、巩膜损伤、眼部纤维化病变

合成胶原、弹性纤维，维持巩膜结构坚韧与眼球形态

参与巩膜损伤修复、组织重塑与伤口愈合

调控眼部局部炎症，参与巩膜炎病理反应

异常代谢增殖，介导近视巩膜变薄、眼部纤维化

1.无菌取出组织，预冷 PBS 反复冲洗，去除血迹、气管及杂质组织。

2.将组织剪碎至 1mm³ 细小组织块，PBS 反复漂洗，去除漂浮杂质与死细胞。

3.加入混合消化液（胰酶 + 胶原酶），37℃水浴消化 20~30min，间断轻柔吹打；血清培养基加入终止消化。

4.细胞悬液过 100μm 滤网，收集滤液，300g 离心 5min，弃上清，PBS 重悬洗涤一次。

5.完全培养基重悬细胞，调整合适密度接种于培养皿；置于 37℃、5% CO₂培养箱静置培养。

6.培养 24h 后首次换液，利用差速贴壁特性：成纤维细胞贴壁快，去除未贴壁上皮等杂细胞；之后每 2~3 天换液一次。